So stellen Sie effiziente Lösungen für die DNA-Fragmentsortierung bereit?

Derzeit, Viele Probleme in der molekularbiologischen Forschung erfordern die Einstufung der DNA nach Größe, Dies wird als Fragmentsortierung bezeichnet. Elektrophorese auf Agarosegel ermöglicht die Trennung von DNA im Bereich von 10 ⁵~Hunderte von Basenpaaren. Im Gegensatz, Elektrophorese auf Acrylamidgel ermöglicht die Trennung von DNA im Bereich von Tausenden von Basenpaaren. Um bei diesen Trennverfahren eine hohe Auflösung zu erreichen, Der Größenunterschied zur Trennung zweier Fragmente sollte sein 10% und einem Nukleinsäuregehalt von bis zu 5 Zu 10 Milligramm.

Die selektive Fällungsmethode, eine Kombination aus Polyethylenglykol und biologischen Magnetkügelchen, zeichnet sich durch einen effizienteren und bequemeren Ansatz zur Fragmentsortierung aus. In hohen Konzentrationen von PEG- und NaCl-Lösungen, PEG zerstört die Hydratationsschicht außerhalb der DNA-Moleküle, wodurch sie sich zusammenballen und ausfallen. Dadurch werden die negativ geladenen Phosphatgruppen freigelegt, die dann eine „Salzbrücke“ bilden’ mit den Carboxylgruppen auf den Magnetkügelchen’ Oberfläche, Dadurch kann DNA an den Perlen adsorbiert werden.

Je länger die DNA, die stärker negativ geladenen Phosphatgruppen werden an der Oberfläche freigelegt, Dadurch wird das gesamte Molekül negativer geladen und lässt sich leichter an Magnetkügelchen adsorbieren, und es kann mit geringeren Konzentrationen an PEG und NaCl gewonnen werden. Je kürzer die DNA, desto höher ist die Konzentration an PEG und NaCl, die erforderlich ist, um die Hydratationsschicht auf seiner Oberfläche gründlich aufzubrechen, Dadurch werden genügend negativ geladene Phosphatgruppen freigelegt, um von Magnetkügelchen adsorbiert und anschließend wiederhergestellt zu werden. Wenn Sie kürzere DNA-Fragmente wiederherstellen möchten, Sie müssen eine größere Menge magnetischer Perlen hinzufügen. Das Verhältnis der Magnetkügelchen-Suspension zur Probe beeinflusst auch die Größe der Fragmente beim Screening. B. die Erhöhung der Konzentration der Magnetkügelchen-Suspension, Die Magnetkügelchen erhöhen ihre Adsorptionskapazität für kleine Fragmente zusätzlich zu großen Fragmenten.

Wenn ein DNA-Fragment einer bestimmten Länge durch Magnetkügelchen getrennt werden soll, Typischerweise werden zwei Sortierrunden durchgeführt. In der ersten Runde, Die Magnetkügelchen binden an DNA mit höherem Molekulargewicht, die dann durch Wegwerfen der Perlen entfernt wird. In der zweiten Runde geht es um das verbleibende Produkt, Dabei binden die Magnetkügelchen an DNA mit höherem Molekulargewicht und entfernen DNA mit niedrigerem Molekulargewicht durch Verwerfen des Überstands.

Beide doppelsträngige DNA, Einzelsträngige DNA, und RNA kann negativ geladene Phosphatgruppen in Lösung dissoziieren, sodass sie mit Magnetkügelchen gereinigt und zurückgewonnen werden können. Jedoch, Einzelsträngige DNA und RNA können nicht auf Fragmentgröße untersucht werden. Die Sekundärstruktur doppelsträngiger DNA ist im Allgemeinen ein relativ stabiles lineares Doppelhelix-Molekül. In Gegenwart von PEG, Die Anzahl der dissoziierten negativ geladenen Phosphatgruppen korreliert positiv mit seiner Länge. Jedoch, RNA und einzelsträngige DNA weisen komplexe Sekundärstrukturen auf, die verhindern, dass die exponierten negativen Gruppen positiv mit der Länge korrelieren, Dies macht es unmöglich, Fragmente wie DNA zu screenen. Zusätzlich, aufgrund der unterschiedlichen Stabilität von DNA und RNA bei unterschiedlichen pH-Werten, Der pH-Wert der zur Reinigung von DNA und RNA verwendeten Puffer ist unterschiedlich, da DNA und RNA unter unterschiedlichen pH-Bedingungen eine unterschiedliche Stabilität aufweisen.

Die fragmentsortierenden Magnetkügelchen von Shanghai Lingjun Biotechnology werden unabhängig vom Rohmaterial bis zum fertigen Magnetkügelchen entwickelt und hergestellt, mit strenger Qualitätskontrolle, um sicherzustellen, dass die Leistung und Konsistenz des Endprodukts hohen Standards entspricht und eine stabile Produktversorgung gewährleistet ist. Das Unternehmen investiert kontinuierlich in Forschung und Entwicklung, Dabei legen wir stets großen Wert auf die Produktqualität, Kundenzufriedenheit, und Marktwettbewerbsfähigkeit.

Lieferantenvorstellung

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.wurde gegründet in 2016 Das ist ein professioneller Hersteller von biomagnetischen Materialien und Nukleinsäure-Extraktionsreagenzien.

Wir verfügen über umfangreiche Erfahrung in der Extraktion und Reinigung von Nukleinsäuren, Proteinreinigung, Zelltrennung, Chemilumineszenz und andere technische Bereiche.

Unsere Produkte werden in vielen Bereichen weit verbreitet eingesetzt, wie zum Beispiel medizinische Tests, Gentests, universitäre Forschung, genetische Zucht, und so weiter. Wir liefern nicht nur Produkte, sondern können auch OEM übernehmen, ODM, und andere Bedürfnisse. Wenn Sie entsprechende Bedürfnisse haben, Bitte kontaktieren Sie uns unter sales01@lingjunbio.com.