Kontaktformular

Hvordan man leverer effektive løsninger til sortering af DNA-fragmenter?

På nuværende tidspunkt, mange problemer i molekylærbiologisk forskning kræver klassificering af DNA efter størrelse, som er kendt som fragmentsortering. Elektroforese på agarosegel tillader adskillelse af DNA i intervallet af 10 5~ hundredvis af basepar. I modsætning hertil, elektroforese på akrylamidgel tillader adskillelse af DNA i intervallet af tusindvis af basepar. At opnå høj opløsning i disse separationsprocesser, størrelsesforskellen for at adskille to fragmenter skal være 10% og et nukleinsyreindhold på op til 5 til 10 milligram.

Sortering af DNA-fragmenter
Sortering af DNA-fragmenter

Den selektive udfældningsmetode, en kombination af polyethylenglycol og biologiske magnetiske perler, skiller sig ud som en mere effektiv og bekvem tilgang til fragmentsortering. I høje koncentrationer af PEG- og NaCl-opløsninger, PEG forstyrrer hydreringslaget uden for DNA-molekyler, får dem til at aggregere og udfælde. Dette blotlægger de negativt ladede fosfatgrupper, som så danner en 'saltbro’ med carboxylgrupperne på de magnetiske perler’ overflade, tillader DNA at blive adsorberet på perlerne.

Jo længere DNA, de mere negativt ladede fosfatgrupper eksponeres på overfladen, gør hele molekylet mere negativt ladet og lettere at adsorbere på magnetiske perler, og det kan genvindes med lavere koncentrationer af PEG og NaCl. Jo kortere DNA, jo højere koncentration af PEG og NaCl er nødvendig for at nedbryde hydreringslaget på dets overflade grundigt, eksponerer nok negativt ladede fosfatgrupper til at blive adsorberet af magnetiske perler og derefter genvundet. Hvis du ønsker at gendanne kortere DNA-fragmenter, du skal tilføje en større mængde magnetiske perler. Forholdet mellem magnetisk perlesuspension og prøven påvirker også størrelsen af ​​screening af fragmenter. Som en stigning i koncentrationen af ​​magnetisk perlesuspension, de magnetiske perler vil øge deres adsorptionskapacitet for små fragmenter ud over store fragmenter.

Når en specifik længde af DNA-fragmenter skal adskilles af magnetiske perler, Der udføres typisk to sorteringsrunder. I første runde, de magnetiske perler binder til DNA med højere molekylvægt, som derefter fjernes ved at kassere perlerne. Anden runde involverer det resterende produkt, hvor de magnetiske perler binder til DNA med højere molekylvægt og fjerner DNA med lavere molekylvægt ved at kassere supernatanten.

Begge dobbeltstrenget DNA, enkeltstrenget DNA, og RNA kan dissociere negativt ladede fosfatgrupper i opløsning, så de kan renses og genvindes med magnetiske perler. Imidlertid, enkeltstrenget DNA og RNA kan ikke screenes for fragmentstørrelse. Den sekundære struktur af dobbeltstrenget DNA er generelt et relativt stabilt lineært dobbelthelix-molekyle. I nærværelse af PEG, antallet af dissocierede negativt ladede fosfatgrupper er positivt korreleret med dets længde. Imidlertid, RNA og enkeltstrenget DNA har komplekse sekundære strukturer, som forhindrer de udsatte negative grupper i at blive positivt korreleret med længden, gør det umuligt at screene fragmenter som DNA. Desuden, på grund af den varierende stabilitet af DNA og RNA ved forskellige pH-værdier, pH-værdien af ​​de buffere, der bruges til at rense DNA og RNA, er forskellig, fordi DNA og RNA har forskellig stabilitet under forskellige pH-forhold.

Shanghai Lingjun Bioteknologi fragment sorterende magnetiske perler er uafhængigt udviklet og produceret fra råmaterialer til færdige magnetiske perler, med streng kvalitetskontrol for at sikre, at ydeevnen og konsistensen af ​​det endelige produkt lever op til høje standarder og sikre en stabil forsyning af produktet. Virksomheden investerer løbende i forskning og udvikling, altid med absolut fokus på produktkvalitet, kundetilfredshed, og markedets konkurrenceevne.

DNA-ekstraktion/isolering Magnetic Beads-reagenssæt
DNA-ekstraktion/isolering magnetiske perler/reagenssæt

Leverandørintroduktion

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.blev etableret i 2016 som er en professionel producent af biomagnetiske materialer og nukleinsyreekstraktionsreagenser.

Vi har stor erfaring med udvinding og oprensning af nukleinsyre, proteinoprensning, celleadskillelse, kemiluminescens og andre tekniske områder.

Vores produkter er meget udbredt inden for mange områder, såsom medicinsk test, genetisk testning, universitetsforskning, genetisk avl, og så videre. Vi leverer ikke kun produkter, men kan også påtage os OEM, ODM, og andre behov. Hvis du har relaterede behov, er du velkommen til at kontakte os på sales01@lingjunbio.com.

Nyhedsbreve

Indtast din e-mailadresse nedenfor og tilmeld dig vores nyhedsbrev