Demystifiéierend Nukleinsäure Agarose Gel Elektrophorese

An molekulare Biologie Experimenter, d'Qualitéit z'iwwerpréiwen vun Nukleinsäuren extrahéiert duerch magnetesch Perlen Method duerch Agarose Gel Elektrophorese (gel laafen) ass e wichtege Schrëtt. Allerdéngs, Ufänger begéinen dacks e puer konfus Elektrophorese-Phänomener. Wéi eng Informatioun stécht hannert dësen anormalen Phänomener? Wéi kann et dann verhënnert ginn?

1. Band tailing: Eng Warnung vun Nukleinsäure Degradatioun

Wann d'Band kontinuéierlech schmier-ähnlech Schwänz vun uewe bis ënnen weist, et weist normalerweis datt d'Nukleinsäure ofgebaut ass. Dëst kéint sinn well:

1. Degradatioun vun der Probe selwer (Versoen et direkt no der Sammlung ze handhaben oder widderholl Gefrierung an Ofdehnung

2. Nuklease Kontaminatioun gëtt wärend dem Operatiounsprozess agefouert

3. D'Lagerzäit nom Rëss ass ze laang

4. Exzessiv mechanesch Schéierkraaft (ze kräfteg bléist an opfälleg)

Präventiv Moossnamen: Benotzt frësch Proben; Vergewëssert Iech datt d'experimentell Ëmfeld propper a fräi vu Verschmotzung ass; Den Operatiounsprozess ass sanft. Nodeems d'Extraktioun fäerdeg ass, Test et direkt oder späichert et bei -80 ℃.

2. Band Verschlechterung: E Signal dat d'Rescht Gëftstoffer ugeet

Wann d'Banddiffusioun verschwonn ass an d'Grenz net kloer ass, déi allgemeng Ursaach ass:

1. Rescht Salz Ionen (onvollstänneg wäschen

2. Protein oder Polysaccharid Kontaminatioun

3. Ethanol Rescht (beaflosst elektrophoretesch Mobilitéit

Präventiv Moossnamen: Vergewëssert Iech datt all Offallflëssegkeet no der leschter Wäschung grëndlech gesaug gëtt. Loosst d'magnetesch Perlen mëttelméisseg dréchen (d'Uewerfläch soll däischter sinn, awer net gekrackt); Fir komplex Echantillon, d'Zuel vun de Wäschen kann erhéicht ginn.

3. Laachen Bands: Ongerechteg Elektrophoresebedéngungen

Déi zwee Enden vun der Band kromme no uewen an engem “laachen” Form, wat normalerweis mat den Elektrophoresebedéngungen verbonnen ass:

1. Exzessiv elektresch Feldintensitéit (ze héich Volt)

2. Ongläiche Gel Ofkillung

3. D'ionesch Stäerkt vum Elektrophorese-Puffer ass net gëeegent oder et gouf ze vill Mol erëmbenotzt

Präventiv Moossnamen: Gëeegent reduzéiere vun der Elektrophoresespannung; Benotzt frësch preparéiert Elektrophorese-Puffer; Vergewëssert Iech datt den Elektrophoresetank mat engem passenden Kühlapparat ausgestatt ass.

4. Aner dacks gestallte Froen

Keng Band: Et kann wéinst magnetesche Perleverloscht sinn, net genuch Elutioun oder net genuch Probegréisst

Anormal hell Flecken: Et kann RNA Kontaminatioun sinn (an DNA Proben) oder genomesch DNA Kontaminatioun (an RNA Proben)

Berufflech Berodung: Positiv an negativ Kontrolle solle fir all Experiment opgestallt ginn. Dëst hëlleft séier ze bestëmmen ob de Problem an der Probe selwer oder am Extraktiounsprozess läit. Gläichzäiteg, erënneren, datt gekollt Lafen nëmmen den éischte Schrëtt an Qualitéit Inspektioun ass. Fir Downstream Experimenter wéi qPCR a Sequencing, Et ass recommandéiert Nanodrop oder Qubit fir präzis Quantifikatioun ze benotzen.

D'Ursaachen an d'Léisunge vun dësen allgemenge Probleemer ze verstoen kann Iech net nëmmen hëllefen Iech schéin Elektrophoreseresultater z'erreechen, awer och de Schlëssel fir den Erfolleg vun Downstream Experimenter ze garantéieren. Gutt experimentell Gewunnechten a virsiichteg technesch Operatiounen sinn d'Basis fir qualitativ héichwäerteg Nukleinsäureproben ze kréien.

Fournisseur

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd., Ltd.gouf etabléiert an 2016 deen e professionnelle Hiersteller vu biomagnetesche Materialien an Nukleinsäure Extraktiounsreagenz ass.

Mir hu räich Erfahrung an Nukleinsäure Extraktioun an Offäll, Protein Reinigung, Zell Trennung, Chemilumineszenz, an aner technesch Beräicher.

Eis Produkter gi wäit a ville Beräicher benotzt, wéi medizinesch Tester, genetesch Tester, Universitéit Fuerschung, genetesch Zucht, an esou weider. Mir bidden net nëmmen Produkter, awer och kënnen OEM ënnerhuelen, ODM, an aner Besoinen. Wann Dir e verbonne Besoin hutt, weg fillen gratis eis ze kontaktéieren .