न्यूक्लिक एसिड अगारोज जेल वैद्युतकणसंचलन का रहस्योद्घाटन

आण्विक जीवविज्ञान प्रयोगों में, की गुणवत्ता का सत्यापन किया जा रहा है न्यूक्लिक एसिड निकाला गया एगरोज़ जेल वैद्युतकणसंचलन के माध्यम से चुंबकीय मनका विधि द्वारा (जेल चल रहा है) एक महत्वपूर्ण कदम है. तथापि, शुरुआती लोगों को अक्सर कुछ भ्रमित करने वाली वैद्युतकणसंचलन घटना का सामना करना पड़ता है. इन असामान्य घटनाओं के पीछे कौन सी जानकारी छिपी है?? तो फिर इसे कैसे रोका जा सकता है?

1. बैंड टेलिंग: न्यूक्लिक एसिड क्षरण की चेतावनी

जब बैंड ऊपर से नीचे तक लगातार धब्बा जैसी पूंछ दिखाता है, यह आमतौर पर इंगित करता है कि न्यूक्लिक एसिड का क्षरण हो गया है. ऐसा इसलिए हो सकता है क्योंकि:

1. नमूने का ही ह्रास (संग्रहण या बार-बार जमने और पिघलने के बाद इसे तुरंत संभालने में विफलता

2. ऑपरेशन प्रक्रिया के दौरान न्यूक्लिज़ संदूषण पेश किया जाता है

3. क्रैकिंग के बाद भंडारण का समय बहुत लंबा है

4. अत्यधिक यांत्रिक कतरनी बल (अत्यधिक ज़ोर से फूंक मारना और प्रहार करना)

निवारक उपाय: ताजा नमूनों का प्रयोग करें; सुनिश्चित करें कि प्रायोगिक वातावरण स्वच्छ और प्रदूषण से मुक्त है; ऑपरेशन प्रक्रिया सौम्य है. निष्कर्षण पूरा होने के बाद, इसका तुरंत परीक्षण करें या इसे -80℃ पर संग्रहित करें.

2. बैंड धुंधला होना: अवशिष्ट अशुद्धियों को दर्शाने वाला एक संकेत

यदि बैंड प्रसार धुंधला है और सीमा स्पष्ट नहीं है, सबसे आम कारण है:

1. अवशिष्ट नमक आयन (अधूरी धुलाई

2. प्रोटीन या पॉलीसेकेराइड संदूषण

3. इथेनॉल अवशेष (इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलता को प्रभावित करना

निवारक उपाय: सुनिश्चित करें कि अंतिम धुलाई के बाद सारा अपशिष्ट तरल अच्छी तरह से सोख लिया जाए. चुंबकीय मोतियों को मध्यम रूप से सूखने दें (सतह कुंद होनी चाहिए लेकिन फटी नहीं होनी चाहिए); जटिल नमूनों के लिए, धुलाई की संख्या बढ़ाई जा सकती है.

3. मुस्कुराते हुए बैंड: अनुचित वैद्युतकणसंचलन स्थितियाँ

बैंड के दोनों सिरे ऊपर की ओर मुड़ते हैं “मुस्कान” आकार, जो आमतौर पर वैद्युतकणसंचलन स्थितियों से संबंधित होता है:

1. अत्यधिक विद्युत क्षेत्र की तीव्रता (बहुत अधिक वोल्टेज)

2. असमान जेल शीतलन

3. वैद्युतकणसंचलन बफर की आयनिक शक्ति अनुपयुक्त है या इसका कई बार पुन: उपयोग किया गया है

निवारक उपाय: वैद्युतकणसंचलन वोल्टेज को उचित रूप से कम करें; ताजा तैयार इलेक्ट्रोफोरेसिस बफर का उपयोग करें; सुनिश्चित करें कि इलेक्ट्रोफोरेसिस टैंक उपयुक्त शीतलन उपकरण से सुसज्जित है.

4. अन्य अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न

कोई बैंड नहीं: यह चुंबकीय मनका हानि के कारण हो सकता है, अपर्याप्त निक्षालन या अपर्याप्त नमूना आकार

असामान्य चमकीले धब्बे: यह आरएनए संदूषण हो सकता है (डीएनए नमूनों में) या जीनोमिक डीएनए संदूषण (आरएनए नमूनों में)

पेशेवर सलाह: प्रत्येक प्रयोग के लिए सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण स्थापित किए जाने चाहिए. इससे यह तुरंत पता लगाने में मदद मिलती है कि समस्या नमूने में है या निष्कर्षण प्रक्रिया में. एक ही समय पर, याद रखें कि गोंद चलाना गुणवत्ता निरीक्षण में केवल पहला कदम है. क्यूपीसीआर और अनुक्रमण जैसे डाउनस्ट्रीम प्रयोगों के लिए, सटीक परिमाणीकरण के लिए नैनोड्रॉप या क्यूबिट का उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है.

इन सामान्य समस्याओं के कारणों और समाधानों को समझने से न केवल आपको सुंदर वैद्युतकणसंचलन परिणाम प्राप्त करने में मदद मिल सकती है, बल्कि डाउनस्ट्रीम प्रयोगों की सफलता सुनिश्चित करने की कुंजी भी बनें. अच्छी प्रयोगात्मक आदतें और सावधानीपूर्वक तकनीकी संचालन उच्च गुणवत्ता वाले न्यूक्लिक एसिड नमूने प्राप्त करने की नींव हैं.

देने वाला

शंघाई लिंगजुन बायोटेक्नोलॉजी कंपनी, लिमिटेडमें स्थापित किया गया था 2016 जो बायोमैग्नेटिक सामग्रियों और न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण अभिकर्मकों का एक पेशेवर निर्माता है.

हमारे पास न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और शुद्धिकरण में समृद्ध अनुभव है, प्रोटीन शुद्धि, कोशिका पृथक्करण, chemiluminescence, और अन्य तकनीकी क्षेत्र.

हमारे उत्पाद कई क्षेत्रों में व्यापक रूप से उपयोग किए जाते हैं, जैसे चिकित्सा परीक्षण, आनुवंशिक परीक्षण, विश्वविद्यालय अनुसंधान, आनुवंशिक प्रजनन, और इसी तरह. हम न केवल उत्पाद उपलब्ध कराते हैं बल्कि ओईएम का कार्य भी कर सकते हैं, ओडीएम, और अन्य जरूरतें. यदि आपको इससे संबंधित कोई आवश्यकता है, हमसे संपर्क करने के लिए कृपया स्वतंत्र महसूस करें .