Демистифицирующий электрофорез нуклеиновых кислот в агарозном геле

В экспериментах по молекулярной биологии, проверка качества нуклеиновые кислоты, выделенные методом магнитных шариков посредством электрофореза в агарозном геле (гель для бега) это решающий шаг. Однако, новички часто сталкиваются с некоторыми запутанными явлениями электрофореза. Какая информация скрывается за этими аномальными явлениями? Тогда как это можно предотвратить?

1. Отслеживание полосы: Предупреждение о деградации нуклеиновых кислот

Когда полоса демонстрирует непрерывный размытый хвост сверху вниз., обычно это указывает на то, что нуклеиновая кислота деградировала. Это может быть потому, что:

1. Деградация самого образца (неспособность обращаться с ним сразу после сбора или неоднократное замораживание и оттаивание.

2. Загрязнение нуклеазами происходит в процессе эксплуатации.

3. Срок хранения после взлома слишком велик

4. Чрезмерная механическая сила сдвига (слишком энергичные удары и удары)

Профилактические меры: Используйте свежие образцы; Убедитесь, что экспериментальная среда чистая и свободная от загрязнений.; Процесс работы щадящий. После завершения извлечения, немедленно проверьте его или храните при -80 ℃..

2. Размытие полосы: Сигнал, указывающий на наличие остаточных примесей

Если диффузия зон размыта и граница нечеткая, самая частая причина это:

1. Остаточные ионы соли (неполная стирка

2. Загрязнение белками или полисахаридами

3. Остаток этанола (влияющие на электрофоретическую подвижность

Профилактические меры: Убедитесь, что после последней стирки вся отработанная жидкость тщательно всасывается.. Дайте магнитным шарикам умеренно высохнуть. (поверхность должна быть матовой, но не потрескавшейся); Для сложных образцов, количество стирок можно увеличить.

3. Улыбающиеся группы: Неправильные условия электрофореза

Два конца полосы изгибаются вверх в “улыбка” форма, что обычно связано с условиями электрофореза:

1. Чрезмерная напряженность электрического поля (слишком высокое напряжение)

2. Неравномерное охлаждение геля

3. Ионная сила буфера для электрофореза не соответствует требованиям или он использовался повторно слишком много раз.

Профилактические меры: Соответствующим образом уменьшите напряжение электрофореза.; Используйте свежеприготовленный буфер для электрофореза.; Убедитесь, что резервуар для электрофореза оснащен соответствующим охлаждающим устройством..

4. Другие часто задаваемые вопросы

Нет группы: Это может быть связано с потерей магнитного шарика., недостаточное элюирование или недостаточный размер образца

Аномальные яркие пятна: Это может быть загрязнение РНК. (в образцах ДНК) или загрязнение геномной ДНК (в образцах РНК)

Профессиональные консультации: Положительный и отрицательный контроль должен быть установлен для каждого эксперимента.. Это помогает быстро определить, кроется ли проблема в самом образце или в процессе экстракции.. В то же время, Помните, что нанесение клея — это только первый шаг в проверке качества.. Для последующих экспериментов, таких как qPCR и секвенирование, для точного количественного определения рекомендуется использовать Nanodrop или Qubit..

Понимание причин и решений этих распространенных проблем может не только помочь вам добиться прекрасных результатов электрофореза., но также быть ключом к обеспечению успеха дальнейших экспериментов.. Хорошие экспериментальные навыки и тщательные технические операции являются основой для получения высококачественных образцов нуклеиновых кислот..

Поставщик

Шанхайская биотехнологическая компания Линцзюнь., ОООбыл создан в 2016 который является профессиональным производителем биомагнитных материалов и реагентов для экстракции нуклеиновых кислот..

Мы имеем богатый опыт в экстракции и очистке нуклеиновых кислот., очистка белка, разделение клеток, хемилюминесценция, и другие технические области.

Наша продукция широко используется во многих областях., например, медицинское тестирование, генетическое тестирование, университетские исследования, генетическое разведение, и так далее. Мы не только поставляем продукцию, но и можем взять на себя OEM, ОДМ, и другие потребности. Если у вас есть соответствующая потребность, пожалуйста, не стесняйтесь обращаться к нам .