수수께끼 풀기 핵산 아가로스 겔 전기영동

분자 생물학 실험에서, 품질을 검증하는 것 추출된 핵산 아가로스겔 전기영동을 통한 자기비드법으로 (젤 러닝) 중요한 단계입니다. 하지만, 초보자는 종종 혼란스러운 전기 영동 현상에 직면합니다.. 이러한 비정상적인 현상 뒤에는 어떤 정보가 숨겨져 있습니까?? 그렇다면 어떻게 예방할 수 있을까??

1. 밴드 테일링: 핵산 분해 경고

밴드가 위에서 아래로 연속적으로 스미어 같은 테일링을 보이는 경우, 이는 일반적으로 핵산이 분해되었음을 나타냅니다.. 다음과 같은 이유일 수 있습니다.:

1. 샘플 자체의 저하 (수집 후 즉시 처리하지 않거나 냉동과 해동을 반복한 경우

2. 작업 과정에서 뉴클레아제 오염이 유입됩니다.

3. 크래킹 후 보관 시간이 너무 깁니다.

4. 과도한 기계적 전단력 (지나치게 세게 불고 치는 것)

예방 조치: 신선한 샘플을 사용하세요; 실험 환경이 깨끗하고 오염이 없는지 확인하십시오.; 작업과정이 순조롭습니다. 추출이 완료된 후, 즉시 테스트하거나 -80℃에 보관하세요..

2. 밴드 블러링: 잔여 불순물을 나타내는 신호

밴드확산이 흐릿하고 경계가 불분명한 경우, 가장 일반적인 이유는:

1. 잔류염이온 (불완전한 세탁

2. 단백질 또는 다당류 오염

3. 에탄올 잔류물 (전기영동 이동성에 영향을 미치는

예방 조치: 마지막 세척 후 모든 폐액을 완전히 흡입했는지 확인하십시오.. 자성 비드를 적당히 건조시키십시오. (표면은 무뎌야 하지만 갈라지지 않아야 합니다.); 복잡한 샘플의 경우, 세탁 횟수를 늘릴 수 있습니다.

3. 웃는 밴드: 부적절한 전기영동 조건

밴드의 두 끝은 위쪽으로 휘어져 있습니다. “웃다” 모양, 이는 일반적으로 전기영동 조건과 관련이 있습니다.:

1. 과도한 전기장 강도 (너무 높은 전압)

2. 고르지 못한 젤 냉각

3. 전기영동 완충액의 이온 강도가 부적절하거나 너무 많이 재사용되었습니다.

예방 조치: 전기영동 전압을 적절하게 낮추십시오.; 새로 준비된 전기영동 완충액을 사용하세요.; 전기영동 탱크에 적절한 냉각 장치가 장착되어 있는지 확인하십시오..

4. 기타 자주 묻는 질문

밴드 없음: 자기 비드 손실로 인한 것일 수 있습니다., 불충분한 용리 또는 불충분한 샘플 크기

비정상적인 밝은 점: RNA 오염일 수도 있습니다 (DNA 샘플에서) 또는 게놈 DNA 오염 (RNA 샘플에서)

전문적인 조언: 각 실험마다 긍정적이고 부정적인 컨트롤을 설정해야 합니다.. 이는 문제가 샘플 자체에 있는지 아니면 추출 과정에 있는지 빠르게 판단하는 데 도움이 됩니다.. 동시에, 접착제 도포는 품질 검사의 첫 번째 단계일 뿐이라는 점을 기억하십시오.. qPCR 및 시퀀싱과 같은 다운스트림 실험용, 정확한 정량을 위해서는 Nanodrop이나 Qubit을 사용하는 것이 좋습니다..

이러한 일반적인 문제의 원인과 해결 방법을 이해하면 아름다운 전기영동 결과를 얻는 데 도움이 될 뿐만 아니라, 다운스트림 실험의 성공을 보장하는 열쇠이기도 합니다.. 좋은 실험 습관과 세심한 기술 운영은 고품질 핵산 샘플을 얻기 위한 기초입니다..

공급자

상하이 링쥔 생명공학 유한회사, 주식회사에 설립되었습니다 2016 생체자성재료 및 핵산추출시약 전문제조업체입니다..

핵산 추출 및 정제 분야에서 풍부한 경험을 보유하고 있습니다., 단백질 정제, 세포 분리, 화학발광, 및 기타 기술 분야.

우리의 제품은 많은 분야에서 널리 사용됩니다., 의료 테스트와 같은, 유전자 검사, 대학 연구, 유전자 육종, 등. 우리는 제품을 제공할 뿐만 아니라 OEM도 수행할 수 있습니다., ODM, 그리고 다른 필요. 관련된 필요사항이 있는 경우, 저희에게 연락하게 자유롭게 느끼십시오 .