Apa kelebihan metode magnetic bead untuk ekstraksi RNA dibandingkan dengan metode Trizol?

1.Untuk memahami perbedaan kedua metode tersebut, penting untuk terlebih dahulu memahami prinsip-prinsip mereka:

 Metode Trizol melibatkan penggunaan pelarut organik seperti fenol dan kloroform untuk melisiskan sel, sehingga memisahkan RNA dari DNA dan protein. RNA larut dalam fase air dan dimurnikan setelah pengendapan dengan isopropanol. Metode manik magnetik melepaskan RNA melalui larutan lisis, di mana matriks silika atau gugus fungsi tertentu pada manik-manik magnetik secara khusus menyerap RNA di lingkungan dengan garam tinggi. Setelah dicuci, RNA dielusi dalam larutan rendah garam.

• Selain itu, ada beberapa perbedaan dalam proses pengoperasian keduanya:

Melangkah	Metode manik magnetik	Trizol metode
Lisis	Lisis lisat yang cepat (otomatis)	Penggilingan/penghancuran manual + Lisis trizol
Memisahkan	Manik-manik magnetik menyerap RNA dan pemisahan bingkai magnetik	Stratifikasi sentrifugal (fase air/organik)
Mencuci	Manik-manik magnetik dicuci dengan etanol/buffer garam tinggi	75% etanol digunakan untuk membersihkan endapan
Pulih	Elusi buffer garam rendah	Pengendapan isopropanol + pengeringan udara
Waktu	40-60 menit (sepenuhnya otomatis)	40-60 menit (sepenuhnya otomatis)

• Perbedaan kualitas RNA yang diekstraksi dengan kedua metode:

 Kemurnian:

metode trizol: OD260/280≈1.8-2.0, yang mudah dipengaruhi oleh residu fenol atau kontaminasi protein.

Metode manik magnetik: kemurnian yang lebih tinggi (OD260/280 sering>1.9), dengan residu pengotor yang lebih sedikit.、

Kasus: Seorang pelanggan menggunakan metode Trizol dan metode manik magnetik untuk mengekstraksi RNA sel secara manual dari sel neuro2A yang melekat.

Sebelum mengekstraksi RNA sel, komponen dihitung untuk mengurangi kesalahan, dan hasilnya sebagai berikut

Mencicipi	Jumlah sel
1-1	4.11E6
2-1	5.93E6
3-1	6.98E5
1-2	4.35E6
2-2	5.72E6
3-2	6.82E5

Kemudian digunakan metode Trizol dan metode magnetic bead untuk mengekstraksi sampel secara manual, dan hasilnya sebagai berikut

Mencicipi	Metode	A260/A280	A260/A230	Kesimpulan.(dari/uL)	EB	Menghasilkan（kamuG)
1-1	Manik-manik Mag	2.093	2.222	2742.5	50kamu	137.125
2-1		2.072	2.080	2835.4		141.77
3-1		2.038	2.001	470.08		23.504
1-2	Trizol	1.792	0.587	331.68	100kamu	33.168
2-2		1.728	0.655	374.68		37.468
3-2		1.650	0.618	107.72		10.772

Dalam hal hasil, metode manik magnetik secara signifikan mengungguli metode Trizol di semua sampel, khususnya pada sampel 1 Dan 2, dimana hasil melebihi 100ug, dibandingkan dengan 30-40ug untuk metode Trizol. Hal ini menunjukkan bahwa metode manik magnetik menawarkan efisiensi ekstraksi yang lebih tinggi.

Dalam hal kemurnian, nilai A260/A280 dan A260/A230 dari RNA yang diekstraksi dengan metode manik magnetik keduanya di atas 2, memenuhi standar RNA berkualitas tinggi. Sebaliknya, metode Trizol menghasilkan RNA dengan kemurnian lebih rendah, dengan nilai A260/A280 berkisar dari 1.6 ke 1.7, menunjukkan penghilangan protein yang tidak lengkap. Selain itu, Nilai A260/A230 ada di bawah 0.7, menunjukkan kemungkinan sisa senyawa organik atau garam.

 Keseluruhan, metode manik magnetik unggul dalam percobaan ini, menawarkan hasil yang tinggi, kemurnian tinggi, dan kemudahan pengoperasian, menjadikannya lebih unggul dari metode Trizol tradisional dan ideal untuk eksperimen hilir yang memerlukan kualitas tinggi. RNA yang diekstraksi akan digunakan dalam eksperimen qPCR untuk menyelidiki perubahan ekspresi gen.

 Lebih-lebih lagi, metode manik magnetik menawarkan keuntungan tambahan, seperti otomatisasi untuk sampel throughput tinggi (seperti pelat 96 sumur), darah, air liur, dan sampel lain yang mudah diproses, dan kompatibilitas yang kuat, sehingga sangat cocok untuk skrining klinis atau skala besar.

Ringkasan: Pilih metode Trizol ketika menangani sampel yang kompleks (seperti jaringan yang kaya akan polisakarida dan polifenol) dan ketika kendala anggaran menjadi perhatian. Pilih metode manik magnetik untuk throughput tinggi, otomatis, dan ekstraksi cepat, atau ketika berfokus pada kemurnian dan keamanan (seperti dalam diagnostik klinis). Kecenderungan: Karena standarisasinya yang tinggi, metode manik magnetik menjadi semakin populer, terutama dalam pengobatan presisi.

Lnjnbio Reagen ekstraksi RNA kecil universal (metode manik magnetik)

Pemasok

Shanghai Lingjun Bioteknologi Co., Ltd.didirikan pada 2016 yang merupakan produsen profesional bahan biomagnetik dan reagen ekstraksi asam nukleat.

Kami memiliki pengalaman yang kaya dalam ekstraksi dan pemurnian asam nukleat, pemurnian protein, pemisahan sel, kimialuminesensi, dan bidang teknis lainnya.

Produk kami banyak digunakan di berbagai bidang, misalnya tes kesehatan, pengujian genetik, penelitian universitas, pemuliaan genetik, dan sebagainya. Kami tidak hanya menyediakan produk tetapi juga dapat melakukan OEM, ODM, dan kebutuhan lainnya. Jika Anda memiliki kebutuhan terkait, jangan ragu untuk menghubungi kami .