ما هي مميزات طريقة الخرزة المغناطيسية لاستخراج الحمض النووي الريبوزي مقارنة بطريقة تريزول?

1.لفهم الاختلافات بين الطريقتين, فمن الضروري أن نفهم أولا مبادئهم:

 تتضمن طريقة Trizol استخدام المذيبات العضوية مثل الفينول والكلوروفورم لتحلل الخلايا, وبالتالي فصل الحمض النووي الريبي (RNA) عن الحمض النووي (DNA) والبروتينات. يذوب الحمض النووي الريبي (RNA) في الطور المائي ويتم تنقيته بعد الترسيب باستخدام الأيزوبروبانول. تقوم طريقة الخرزة المغناطيسية بإطلاق الحمض النووي الريبي (RNA) من خلال محلول التحلل, حيث تقوم مصفوفة السيليكا أو مجموعات وظيفية محددة على الخرز المغناطيسي بامتصاص الحمض النووي الريبي (RNA) على وجه التحديد في بيئة عالية الملح. بعد الغسيل, يتم التخلص من الحمض النووي الريبي (RNA) في محلول قليل الملح.

• فضلاً عن ذلك, هناك بعض الاختلافات في عملية تشغيل الاثنين:

خطوة	طريقة الخرزة المغناطيسية	تريزول طريقة
تحلل	التحلل السريع للمحللة (الآلي)	الطحن/السحق اليدوي + تحلل تريزول
متفرق	الخرز المغناطيسي الممتز RNA وفصل الإطار المغناطيسي	التقسيم الطبقي بالطرد المركزي (المرحلة المائية / العضوية)
غسل	تم غسل الخرز المغناطيسي باستخدام محلول الإيثانول / الملح العالي	75% تم استخدام الإيثانول لتنظيف الراسب
استرداد	شطف عازلة الملح منخفضة	هطول الأيزوبروبانول + تجفيف الهواء
وقت	40-60 دقائق (أوتوماتيكي بالكامل)	40-60 دقائق (أوتوماتيكي بالكامل)

• الفرق في جودة الحمض النووي الريبي المستخرج بالطريقتين:

 نقاء:

طريقة تريزول: OD260/280≈1.8-2.0, والتي تتأثر بسهولة ببقايا الفينول أو تلوث البروتين.

طريقة الخرزة المغناطيسية: نقاء أعلى (OD260/280 في كثير من الأحيان>1.9), مع بقايا أقل من الشوائب.、

قضية: استخدم أحد العملاء طريقة Trizol وطريقة الخرزة المغناطيسية لاستخراج الحمض النووي الريبي (RNA) للخلية يدويًا من الخلايا الملتصقة neuro2A.

قبل استخراج الحمض النووي الريبي الخلية, تم حساب المكونات لتقليل الأخطاء, والنتائج هي كما يلي

عينة	عدد الخلايا
1-1	4.11ه6
2-1	5.93ه6
3-1	6.98E5
1-2	4.35ه6
2-2	5.72ه6
3-2	6.82E5

ثم تم استخدام طريقة تريزول وطريقة الخرزة المغناطيسية لاستخراج العينات يدوياً, والنتائج هي كما يلي

عينة	طريقة	A260/A280	A260/A230	Conc.(من / ماي)	إب	أَثْمَر(شز)
1-1	حبات ماج	2.093	2.222	2742.5	50ماي	137.125
2-1		2.072	2.080	2835.4		141.77
3-1		2.038	2.001	470.08		23.504
1-2	تريزول	1.792	0.587	331.68	100ماي	33.168
2-2		1.728	0.655	374.68		37.468
3-2		1.650	0.618	107.72		10.772

من حيث العائد, تتفوق طريقة الخرزة المغناطيسية بشكل كبير على طريقة Trizol في جميع العينات, وخاصة في العينات 1 و 2, حيث يتجاوز العائد 100 ميكروغرام, مقارنة بـ 30-40 ميكروغرام لطريقة تريزول. يشير هذا إلى أن طريقة الخرزة المغناطيسية توفر كفاءة استخلاص أعلى.

من حيث الطهارة, قيم A260/A280 وA260/A230 للحمض النووي الريبي (RNA) المستخرج بواسطة طريقة الخرزة المغناطيسية كلاهما أعلاه 2, تلبية معايير RNA عالية الجودة. في المقابل, طريقة Trizol تنتج الحمض النووي الريبي (RNA) بنقاء أقل, مع قيم A260/A280 تتراوح من 1.6 ل 1.7, يشير إلى إزالة البروتين غير كاملة. بالإضافة إلى ذلك, قيم A260/A230 أدناه 0.7, مما يشير إلى احتمال وجود مركبات عضوية أو ملحية متبقية.

 إجمالي, تتفوق طريقة الخرزة المغناطيسية في هذه التجربة, تقدم غلة عالية, درجة نقاء عالية, وسهولة التشغيل, مما يجعلها متفوقة على طريقة Trizol التقليدية ومثالية للتجارب النهائية التي تتطلب جودة عالية. سيتم استخدام الحمض النووي الريبي المستخرج في تجارب qPCR للتحقيق في تغييرات التعبير الجيني.

 علاوة على ذلك, توفر طريقة الخرزة المغناطيسية مزايا إضافية, مثل التشغيل الآلي للعينات عالية الإنتاجية (مثل لوحات 96-جيدا), دم, اللعاب, وغيرها من العينات التي تتم معالجتها بسهولة, والتوافق القوي, مما يجعلها مناسبة بشكل خاص للفحص السريري أو واسع النطاق.

ملخص: اختر طريقة Trizol عند التعامل مع العينات المعقدة (مثل الأنسجة الغنية بالسكريات والبوليفينول) وعندما تكون قيود الميزانية مصدر قلق. اختر طريقة الخرزة المغناطيسية للإنتاجية العالية, الآلي, والاستخراج السريع, أو عند التركيز على النقاء والسلامة (كما هو الحال في التشخيص السريري). اتجاه: بسبب توحيدها العالي, أصبحت طريقة الخرزة المغناطيسية ذات شعبية متزايدة, وخاصة في الطب الدقيق.

Lnjnbio كاشف استخراج الحمض النووي الريبي الصغير العالمي (طريقة حبة مغناطيسية)

مزود

شركة شنغهاي لينغجون للتكنولوجيا الحيوية, المحدودة.تأسست في 2016 وهي شركة متخصصة في تصنيع المواد المغناطيسية الحيوية وكواشف استخلاص الحمض النووي.

لدينا خبرة غنية في استخراج وتنقية الحمض النووي, تنقية البروتين, فصل الخلايا, التألق الكيميائي, وغيرها من المجالات التقنية.

منتجاتنا تستخدم على نطاق واسع في العديد من المجالات, مثل الفحوصات الطبية, الاختبارات الجينية, البحوث الجامعية, التكاثر الوراثي, وهكذا. نحن لا نقدم المنتجات فحسب، بل يمكننا أيضًا إجراء تصنيع المعدات الأصلية, أوديإم, وغيرها من الاحتياجات. إذا كان لديك حاجة ذات صلة, لا تتردد في الاتصال بنا .