Hva er fordelene med magnetisk perlemetode for RNA-ekstraksjon sammenlignet med Trizol-metoden?

1.For å forstå forskjellene mellom de to metodene, det er viktig å først forstå prinsippene deres:

 Trizol-metoden innebærer å bruke organiske løsemidler som fenol og kloroform for å lysere celler, og skiller dermed RNA fra DNA og proteiner. RNA løses opp i den vandige fasen og renses etter utfelling med isopropanol. Den magnetiske perlemetoden frigjør RNA gjennom lyseringsløsningen, hvor silikamatrisen eller spesifikke funksjonelle grupper på de magnetiske kulene spesifikt adsorberer RNA i et miljø med høyt saltinnhold. Etter vask, RNA elueres i en lavsaltløsning.

• I tillegg, det er noen forskjeller i operasjonsprosessen til de to:

Skritt	Magnetisk perlemetode	Trizol metode
Lysis	Rask lysis av lysat (automatisert)	Manuell sliping/pulverisering + Trizollyse
Skille	Magnetiske perler adsorberte RNA og magnetisk rammeseparasjon	Sentrifugal lagdeling (vandig/organisk fase)
Vaske	De magnetiske kulene ble vasket med etanol/høy saltbuffer	75% etanol ble brukt for å rense bunnfallet
Komme seg	Lav saltbuffer eluering	Isopropanolutfelling + lufttørking
Tid	40-60 minutter (helautomatisk)	40-60 minutter (helautomatisk)

• Kvalitetsforskjellen på RNA ekstrahert ved de to metodene:

 Renhet:

Trizol-metoden: OD260/280≈1,8-2,0, som lett påvirkes av fenolrester eller proteinforurensning.

Magnetisk perlemetode: høyere renhet (OD260/280 er ofte>1.9), med mindre rester av urenheter.、

Sak: En kunde brukte Trizol-metoden og magnetisk perlemetode for å manuelt ekstrahere celle-RNA fra adherente celler neuro2A.

Før ekstrahering av celle-RNA, komponentene ble talt for å redusere feil, og resultatene er som følger

Prøve	Celletall
1-1	4.11E6
2-1	5.93E6
3-1	6.98E5
1-2	4.35E6
2-2	5.72E6
3-2	6.82E5

Deretter ble Trizol-metoden og magnetisk perlemetode brukt for å trekke ut prøvene manuelt, og resultatene er som følger

Prøve	Metode	A260/A280	A260/A230	Kons.(av/uL)	EB	Avkastning(ug）
1-1	Mag-perler	2.093	2.222	2742.5	50uL	137.125
2-1		2.072	2.080	2835.4		141.77
3-1		2.038	2.001	470.08		23.504
1-2	Trizol	1.792	0.587	331.68	100uL	33.168
2-2		1.728	0.655	374.68		37.468
3-2		1.650	0.618	107.72		10.772

Når det gjelder utbytte, den magnetiske perlemetoden overgår Trizol-metoden betydelig på tvers av alle prøver, spesielt i prøver 1 og 2, hvor utbyttet overstiger 100 ug, sammenlignet med 30-40 ug for Trizol-metoden. Dette indikerer at den magnetiske perlemetoden gir høyere utvinningseffektivitet.

Når det gjelder renhet, A260/A280- og A260/A230-verdiene til RNA ekstrahert ved magnetisk perlemetoden er begge ovenfor 2, oppfyller høykvalitets RNA-standarder. I kontrast, Trizol-metoden gir RNA med lavere renhet, med A260/A280-verdier fra 1.6 til 1.7, som indikerer ufullstendig proteinfjerning. I tillegg, A260/A230-verdier er nedenfor 0.7, antyder mulige gjenværende organiske eller saltforbindelser.

 Totalt sett, den magnetiske perlemetoden utmerker seg i dette eksperimentet, gir høy avkastning, høy renhet, og enkel betjening, gjør den overlegen den tradisjonelle Trizol-metoden og ideell for nedstrøms eksperimenter som krever høy kvalitet. Det ekstraherte RNAet vil bli brukt i qPCR-eksperimenter for å undersøke endringer i genuttrykk.

 Dessuten, den magnetiske perlemetoden gir ytterligere fordeler, slik som automatisering for prøver med høy gjennomstrømning (som 96-brønners plater), blod, spytt, og andre enkelt bearbeidede prøver, og sterk kompatibilitet, gjør den spesielt egnet for klinisk eller storskala screening.

Sammendrag: Velg Trizol-metoden når du arbeider med komplekse prøver (som vev rik på polysakkarider og polyfenoler) og når budsjettbegrensninger er en bekymring. Velg den magnetiske perlemetoden for høy gjennomstrømning, automatisert, og rask utvinning, eller når du fokuserer på renhet og sikkerhet (som i klinisk diagnostikk). Trend: På grunn av sin høye standardisering, den magnetiske perlemetoden blir stadig mer populær, spesielt innen presisjonsmedisin.

Lnjnbio Universal liten RNA-ekstraksjonsreagens (magnetisk perlemetode)

Leverandør

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.ble etablert i 2016 som er en profesjonell produsent av biomagnetiske materialer og nukleinsyreekstraksjonsreagenser.

Vi har rik erfaring innen utvinning og rensing av nukleinsyre, proteinrensing, celleseparasjon, kjemiluminescens, og andre tekniske felt.

Våre produkter er mye brukt på mange felt, som medisinsk testing, genetisk testing, universitetsforskning, genetisk avl, og så videre. Vi leverer ikke bare produkter, men kan også påta oss OEM, ODM, og andre behov. Hvis du har et relatert behov, ta gjerne kontakt med oss .