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Quels sont les avantages de la méthode des billes magnétiques pour l'extraction de l'ARN par rapport à la méthode Trizol?

1.Comprendre les différences entre les deux méthodes, il est essentiel de comprendre d'abord leurs principes:

 La méthode Trizol consiste à utiliser des solvants organiques comme le phénol et le chloroforme pour lyser les cellules, séparant ainsi l'ARN de l'ADN et des protéines. L'ARN se dissout dans la phase aqueuse et est purifié après précipitation à l'isopropanol. La méthode des billes magnétiques libère l’ARN via la solution de lyse, où la matrice de silice ou des groupes fonctionnels spécifiques sur les billes magnétiques adsorbent spécifiquement l'ARN dans un environnement riche en sel. Après le lavage, L'ARN est élué dans une solution pauvre en sel.

  • En outre, il existe quelques différences dans le processus de fonctionnement des deux:
ÉtapeMéthode des billes magnétiquesTrizol méthode
LyseLyse rapide du lysat (automatisé)Broyage/pulvérisation manuel + Lyse du trizol
SéparéDes billes magnétiques adsorbent l'ARN et la séparation des cadres magnétiquesStratification centrifuge (phase aqueuse/organique)
LaverLes billes magnétiques ont été lavées avec un tampon éthanol/haute teneur en sel.75% de l'éthanol a été utilisé pour nettoyer le précipité
RécupérerÉlution tampon à faible teneur en selPrécipitation d'isopropanol + séchage à l'air
Temps40-60 minutes (entièrement automatique)40-60 minutes (entièrement automatique)
  • La différence de qualité de l'ARN extrait par les deux méthodes:

 Pureté:

Méthode Trizol: OD260/280≈1,8-2,0, qui est facilement affecté par les résidus de phénol ou la contamination par les protéines.

Méthode des billes magnétiques: pureté supérieure (OD260/280 est souvent>1.9), avec moins de résidus d'impuretés.、

Cas: Un client a utilisé la méthode Trizol et la méthode des billes magnétiques pour extraire manuellement l'ARN cellulaire des cellules adhérentes neuro2A.

Avant d'extraire l'ARN cellulaire, les composants ont été comptés pour réduire les erreurs, et les résultats sont les suivants

ÉchantillonNombre de cellules
1-14.11E6
2-15.93E6
3-16.98E5
1-24.35E6
2-25.72E6
3-26.82E5

Ensuite, la méthode Trizol et la méthode des billes magnétiques ont été utilisées pour extraire les échantillons manuellement., et les résultats sont les suivants

ÉchantillonMéthodeA260/A280A260/A230Conc..(de/ul)EB Rendementtoig)
1-1 Mag-perles2.0932.2222742.5 50uL137.125
2-12.0722.0802835.4141.77
3-12.0382.001470.0823.504
1-2 Trizol1.7920.587331.68 100uL33.168
2-21.7280.655374.6837.468
3-21.6500.618107.7210.772

En termes de rendement, la méthode des billes magnétiques surpasse considérablement la méthode Trizol sur tous les échantillons, surtout dans les échantillons 1 et 2, où le rendement dépasse 100ug, contre 30-40ug pour la méthode Trizol. Cela indique que la méthode des billes magnétiques offre une efficacité d’extraction plus élevée..

En termes de pureté, les valeurs A260/A280 et A260/A230 de l'ARN extrait par la méthode des billes magnétiques sont toutes deux supérieures 2, répondant aux normes d’ARN de haute qualité. En revanche, la méthode Trizol donne un ARN de pureté inférieure, avec des valeurs A260/A280 allant de 1.6 à 1.7, indiquant une élimination incomplète des protéines. En plus, Les valeurs A260/A230 sont inférieures 0.7, suggérant d'éventuels composés organiques ou salins résiduels.

 Dans l'ensemble, la méthode des billes magnétiques excelle dans cette expérience, offrant un rendement élevé, haute pureté, et facilité d'utilisation, ce qui la rend supérieure à la méthode traditionnelle Trizol et idéale pour les expériences en aval exigeant une haute qualité. L'ARN extrait sera utilisé dans des expériences qPCR pour étudier les changements d'expression génique.

 De plus, la méthode des billes magnétiques offre des avantages supplémentaires, comme l'automatisation pour les échantillons à haut débit (comme des plaques à 96 puits), sang, salive, et autres échantillons faciles à traiter, et forte compatibilité, ce qui le rend particulièrement adapté au dépistage clinique ou à grande échelle.

Résumé: Choisissez la méthode Trizol lorsque vous traitez des échantillons complexes (tels que les tissus riches en polysaccharides et polyphénols) et quand les contraintes budgétaires sont une préoccupation. Choisissez la méthode des billes magnétiques pour un haut débit, automatisé, et extraction rapide, ou lorsque vous vous concentrez sur la pureté et la sécurité (comme dans le diagnostic clinique). S'orienter: En raison de sa haute standardisation, la méthode des billes magnétiques devient de plus en plus populaire, surtout en médecine de précision.

Réactif d'extraction universel de petits ARN Lnjnbio (méthode des billes magnétiques)

Fournisseur

Société de biotechnologie Shanghai Lingjun., Ltd.a été établi en 2016 qui est un fabricant professionnel de matériaux biomagnétiques et de réactifs d'extraction d'acide nucléique.

Nous avons une riche expérience dans l'extraction et la purification des acides nucléiques, purification des protéines, séparation cellulaire, chimiluminescence, et autres domaines techniques.

Nos produits sont largement utilisés dans de nombreux domaines, comme les tests médicaux, tests génétiques, recherche universitaire, sélection génétique, et ainsi de suite. Nous fournissons non seulement des produits, mais pouvons également entreprendre des OEM, ODM, et autres besoins. Si vous avez un besoin connexe, n'hésitez pas à nous contacter .

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