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Trizol 法と比較した RNA 抽出における磁気ビーズ法の利点は何ですか?

1.2 つの方法の違いを理解するには, まずその原則を理解することが重要です:

 Trizol 法では、フェノールやクロロホルムなどの有機溶媒を使用して細胞を溶解します。, これにより、DNA およびタンパク質から RNA が分離されます。. RNA は水相に溶解し、イソプロパノールで沈殿させた後に精製されます。. 磁気ビーズ法は溶解溶液を通して RNA を放出します。, シリカマトリックスまたは磁気ビーズ上の特定の官能基が高塩分環境で RNA を特異的に吸着する場合. 洗濯後, RNAは低塩溶液で溶出されます.

  • 加えて, 両者の操作プロセスにはいくつかの違いがあります:
ステップ磁気ビーズ法トリゾール 方法
溶解ライセートの迅速な溶解 (自動化された)手粉砕・粉砕 + トリゾール溶解
別磁気ビーズ吸着 RNA と磁気フレーム分離遠心成層 (水相/有機相)
ウォッシュ磁気ビーズをエタノール/高塩緩衝液で洗浄しました。75% エタノールを使用して沈殿物を洗浄した
回復する低塩緩衝液による溶出イソプロパノール沈殿 + 自然乾燥
時間40-60 分 (全自動)40-60 分 (全自動)
  • 2つの方法で抽出されたRNAの品質の違い:

 純度:

トリゾール法: OD260/280≒1.8-2.0, フェノール残留物やタンパク質汚染の影響を受けやすい.

磁気ビーズ法: より高い純度 (OD260/280が多い>1.9), 不純物残留が少ない。、

場合: お客様は、Trizol 法と磁気ビーズ法を使用して、接着細胞から手動で細胞 RNA を抽出しました。neuro2A.

細胞RNA抽出前, 誤差を減らすためにコンポーネントが数えられました, そして結果は次のとおりです

サンプル細胞数
1-14.11E6
2-15.93E6
3-16.98E5
1-24.35E6
2-25.72E6
3-26.82E5

次に、Trizol 法と磁気ビーズ法を使用してサンプルを手動で抽出しました。, そして結果は次のとおりです

サンプル方法A260/A280A260/A230濃度.(/μL)EB 収率（あなたg）
1-1 マグビーズ2.0932.2222742.5 50uL137.125
2-12.0722.0802835.4141.77
3-12.0382.001470.0823.504
1-2 トリゾール1.7920.587331.68 100uL33.168
2-21.7280.655374.6837.468
3-21.6500.618107.7210.772

収量に関しては, 磁気ビーズ法は、すべてのサンプルにわたって Trizol 法よりも大幅に優れています。, 特にサンプルでは 1 そして 2, 収量が100ugを超える場合, トリゾール法では 30 ～ 40ug と比較. これは、磁気ビーズ法の方が抽出効率が高いことを示しています。.

純度という意味では, 磁気ビーズ法により抽出されたRNAのA260/A280およびA260/A230値が両方とも上記を超えている 2, 高品質の RNA 基準を満たす. 対照的に, Trizol 法では RNA の純度が低くなります, A260/A280 の値の範囲は次のとおりです。 1.6 に 1.7, タンパク質除去が不完全であることを示します. さらに, A260/A230の値は以下の通りです 0.7, 残留有機化合物または塩化合物の可能性を示唆する.

 全体, この実験では磁気ビーズ法が優れています, 高収率を提供する, 高純度, そして操作性も, 従来の Trizol 法よりも優れており、高品質を必要とする下流の実験に最適です。. 抽出された RNA は、遺伝子発現の変化を調査するための qPCR 実験に使用されます。.

 さらに, 磁気ビーズ法にはさらなる利点があります, ハイスループットサンプルの自動化など (96ウェルプレートのような), 血, 唾液, およびその他の簡単に処理できるサンプル, 強力な互換性, 特に臨床または大規模なスクリーニングに適しています。.

まとめ: 複雑なサンプルを扱う場合は Trizol メソッドを選択してください (多糖類やポリフェノールが豊富な組織など) 予算の制約が懸念される場合. ハイスループットを実現するには磁気ビーズ法を選択してください, 自動化された, そして迅速な抽出, または純度と安全性を重視する場合 (臨床診断などで). 傾向: 高度な標準化により、, the magnetic bead method is becoming increasingly popular, especially in precision medicine.

Lnjnbio Universal small RNA extraction reagent (磁気ビーズ法)

サプライヤー

上海霊軍生物技術有限公司, 株式会社に設立されました 2016 生体磁性材料と核酸抽出試薬の専門メーカーです.

核酸抽出・精製の経験が豊富です。, タンパク質の精製, 細胞分離, 化学発光, その他の技術分野.

当社の製品はさまざまな分野で広く使用されています, 医療検査など, 遺伝子検査, 大学の研究, 遺伝子育種, 等々. 製品のご提供だけでなくOEMも承ります, ODM, その他のニーズ. 関連するニーズがある場合, お気軽にお問い合わせください .

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