生体磁気ビーズの専門メーカー
Trizol 法と比較した RNA 抽出における磁気ビーズ法の利点は何ですか?
1.2 つの方法の違いを理解するには, まずその原則を理解することが重要です:
Trizol 法では、フェノールやクロロホルムなどの有機溶媒を使用して細胞を溶解します。, これにより、DNA およびタンパク質から RNA が分離されます。. RNA は水相に溶解し、イソプロパノールで沈殿させた後に精製されます。. 磁気ビーズ法は溶解溶液を通して RNA を放出します。, シリカマトリックスまたは磁気ビーズ上の特定の官能基が高塩分環境で RNA を特異的に吸着する場合. 洗濯後, RNAは低塩溶液で溶出されます.
- 加えて, 両者の操作プロセスにはいくつかの違いがあります:
| ステップ | 磁気ビーズ法 | トリゾール 方法 |
| 溶解 | ライセートの迅速な溶解 (自動化された) | 手粉砕・粉砕 + トリゾール溶解 |
| 別 | 磁気ビーズ吸着 RNA と磁気フレーム分離 | 遠心成層 (水相/有機相) |
| ウォッシュ | 磁気ビーズをエタノール/高塩緩衝液で洗浄しました。 | 75% エタノールを使用して沈殿物を洗浄した |
| 回復する | 低塩緩衝液による溶出 | イソプロパノール沈殿 + 自然乾燥 |
| 時間 | 40-60 分 (全自動) | 40-60 分 (全自動) |
- 2つの方法で抽出されたRNAの品質の違い:
純度:
トリゾール法: OD260/280≒1.8-2.0, フェノール残留物やタンパク質汚染の影響を受けやすい.
磁気ビーズ法: より高い純度 (OD260/280が多い>1.9), 不純物残留が少ない。、
場合: お客様は、Trizol 法と磁気ビーズ法を使用して、接着細胞から手動で細胞 RNA を抽出しました。neuro2A.
細胞RNA抽出前, 誤差を減らすためにコンポーネントが数えられました, そして結果は次のとおりです
| サンプル | 細胞数 |
| 1-1 | 4.11E6 |
| 2-1 | 5.93E6 |
| 3-1 | 6.98E5 |
| 1-2 | 4.35E6 |
| 2-2 | 5.72E6 |
| 3-2 | 6.82E5 |
次に、Trizol 法と磁気ビーズ法を使用してサンプルを手動で抽出しました。, そして結果は次のとおりです
| サンプル | 方法 | A260/A280 | A260/A230 | 濃度.(/μL) | EB | 収率（あなたg） |
| 1-1 | マグビーズ | 2.093 | 2.222 | 2742.5 | 50uL | 137.125 |
| 2-1 | 2.072 | 2.080 | 2835.4 | 141.77 | ||
| 3-1 | 2.038 | 2.001 | 470.08 | 23.504 | ||
| 1-2 | トリゾール | 1.792 | 0.587 | 331.68 | 100uL | 33.168 |
| 2-2 | 1.728 | 0.655 | 374.68 | 37.468 | ||
| 3-2 | 1.650 | 0.618 | 107.72 | 10.772 |
収量に関しては, 磁気ビーズ法は、すべてのサンプルにわたって Trizol 法よりも大幅に優れています。, 特にサンプルでは 1 そして 2, 収量が100ugを超える場合, トリゾール法では 30 ～ 40ug と比較. これは、磁気ビーズ法の方が抽出効率が高いことを示しています。.
純度という意味では, 磁気ビーズ法により抽出されたRNAのA260/A280およびA260/A230値が両方とも上記を超えている 2, 高品質の RNA 基準を満たす. 対照的に, Trizol 法では RNA の純度が低くなります, A260/A280 の値の範囲は次のとおりです。 1.6 に 1.7, タンパク質除去が不完全であることを示します. さらに, A260/A230の値は以下の通りです 0.7, 残留有機化合物または塩化合物の可能性を示唆する.
全体, この実験では磁気ビーズ法が優れています, 高収率を提供する, 高純度, そして操作性も, 従来の Trizol 法よりも優れており、高品質を必要とする下流の実験に最適です。. 抽出された RNA は、遺伝子発現の変化を調査するための qPCR 実験に使用されます。.
さらに, 磁気ビーズ法にはさらなる利点があります, ハイスループットサンプルの自動化など (96ウェルプレートのような), 血, 唾液, およびその他の簡単に処理できるサンプル, 強力な互換性, 特に臨床または大規模なスクリーニングに適しています。.
まとめ: 複雑なサンプルを扱う場合は Trizol メソッドを選択してください (多糖類やポリフェノールが豊富な組織など) 予算の制約が懸念される場合. ハイスループットを実現するには磁気ビーズ法を選択してください, 自動化された, そして迅速な抽出, または純度と安全性を重視する場合 (臨床診断などで). 傾向: 高度な標準化により、, 磁気ビーズ法はますます人気が高まっています, 特に精密医療においては.
Lnjnbio ユニバーサル small RNA 抽出試薬 (磁気ビーズ法)
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上海霊軍生物技術有限公司, 株式会社に設立されました 2016 生体磁性材料と核酸抽出試薬の専門メーカーです.
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