Quali sono i vantaggi del metodo con sfere magnetiche per l'estrazione dell'RNA rispetto al metodo Trizol?

1.Comprendere le differenze tra i due metodi, è fondamentale coglierne innanzitutto i principi:

 Il metodo Trizol prevede l'utilizzo di solventi organici come fenolo e cloroformio per lisare le cellule, separando così l'RNA dal DNA e dalle proteine. L'RNA si dissolve nella fase acquosa e viene purificato dopo precipitazione con isopropanolo. Il metodo delle sfere magnetiche rilascia l'RNA attraverso la soluzione di lisi, dove la matrice di silice o gruppi funzionali specifici sulle sfere magnetiche assorbono specificamente l'RNA in un ambiente ad alto contenuto di sale. Dopo il lavaggio, L'RNA viene eluito in una soluzione a basso contenuto di sale.

• Inoltre, ci sono alcune differenze nel processo operativo dei due:

Fare un passo	Metodo della perla magnetica	Trizol metodo
Lisi	Lisi rapida del lisato (automatizzato)	Macinazione/polverizzazione manuale + Lisi del Trizol
Separato	Le sfere magnetiche hanno assorbito l'RNA e la separazione del telaio magnetico	Stratificazione centrifuga (fase acquosa/organica)
Lavare	Le sfere magnetiche sono state lavate con tampone di etanolo/alto contenuto di sale	75% l'etanolo è stato utilizzato per pulire il precipitato
Recuperare	Eluizione del tampone salino basso	Precipitazione di isopropanolo + asciugatura all'aria
Tempo	40-60 minuti (completamente automatico)	40-60 minuti (completamente automatico)

• La differenza di qualità dell'RNA estratto con i due metodi:

 Purezza:

Metodo Trizol: OD260/280≈1.8-2.0, che viene facilmente intaccato da residui fenolici o contaminazione proteica.

Metodo della perla magnetica: purezza più elevata (OD260/280 è spesso>1.9), con meno residui di impurità.、

Caso: Un cliente ha utilizzato il metodo Trizol e il metodo delle sfere magnetiche per estrarre manualmente l'RNA cellulare dalle cellule aderenti neuro2A.

Prima di estrarre l'RNA cellulare, i componenti sono stati contati per ridurre gli errori, e i risultati sono i seguenti

Campione	Conteggio delle cellule
1-1	4.11E6
2-1	5.93E6
3-1	6.98E5
1-2	4.35E6
2-2	5.72E6
3-2	6.82E5

Quindi sono stati utilizzati il ​​metodo Trizol e il metodo delle sfere magnetiche per estrarre manualmente i campioni, e i risultati sono i seguenti

Campione	Metodo	A260/A280	A260/A230	Concentrato.(di/uL)	EB	Prodotto（tuG)
1-1	Perline magnetiche	2.093	2.222	2742.5	50uL	137.125
2-1		2.072	2.080	2835.4		141.77
3-1		2.038	2.001	470.08		23.504
1-2	Trizol	1.792	0.587	331.68	100uL	33.168
2-2		1.728	0.655	374.68		37.468
3-2		1.650	0.618	107.72		10.772

In termini di rendimento, il metodo delle sfere magnetiche supera significativamente il metodo Trizol in tutti i campioni, soprattutto nei campioni 1 E 2, dove la resa supera i 100ug, rispetto ai 30-40ug del metodo Trizol. Ciò indica che il metodo delle perle magnetiche offre una maggiore efficienza di estrazione.

In termini di purezza, i valori A260/A280 e A260/A230 dell'RNA estratto con il metodo delle biglie magnetiche sono entrambi sopra 2, soddisfare standard di RNA di alta qualità. Al contrario, il metodo Trizol produce RNA con purezza inferiore, con valori A260/A280 compresi tra 1.6 A 1.7, indicando una rimozione incompleta delle proteine. Inoltre, I valori A260/A230 sono riportati di seguito 0.7, suggerendo possibili residui organici o composti salini.

 Complessivamente, il metodo della perla magnetica eccelle in questo esperimento, offrendo un rendimento elevato, elevata purezza, e facilità d'uso, rendendolo superiore al tradizionale metodo Trizol e ideale per esperimenti a valle che richiedono alta qualità. L'RNA estratto verrà utilizzato negli esperimenti qPCR per studiare i cambiamenti dell'espressione genica.

 Inoltre, il metodo della perla magnetica offre ulteriori vantaggi, come l'automazione per campioni ad alto rendimento (come piastre da 96 pozzetti), sangue, saliva, e altri campioni facilmente processabili, e forte compatibilità, rendendolo particolarmente adatto per lo screening clinico o su larga scala.

Riepilogo: Scegli il metodo Trizol quando hai a che fare con campioni complessi (come i tessuti ricchi di polisaccaridi e polifenoli) e quando i vincoli di bilancio sono una preoccupazione. Scegli il metodo con microsfere magnetiche per una produttività elevata, automatizzato, ed estrazione rapida, o quando ci si concentra sulla purezza e sulla sicurezza (come nella diagnostica clinica). Tendenza: Grazie alla sua elevata standardizzazione, il metodo delle perle magnetiche sta diventando sempre più popolare, soprattutto nella medicina di precisione.

Lnjnbio Reagente universale per l'estrazione di piccoli RNA (metodo delle perle magnetiche)

Fornitore

Shanghai Lingjun Biotecnologia Co., Ltd.è stato fondato nel 2016 che è un produttore professionale di materiali biomagnetici e reagenti per l'estrazione degli acidi nucleici.

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I nostri prodotti sono ampiamente utilizzati in molti campi, come i test medici, test genetici, ricerca universitaria, allevamento genetico, e così via. Non solo forniamo prodotti, ma possiamo anche intraprendere l'OEM, ODM, e altre esigenze. Se hai un'esigenza correlata, non esitate a contattarci .