Professionele fabrikant van biomagnetische kralen
Wat zijn de voordelen van de magnetische kralenmethode voor RNA-extractie vergeleken met de Trizol-methode?
1.Om de verschillen tussen de twee methoden te begrijpen, het is essentieel om eerst hun principes te begrijpen:
De Trizol-methode omvat het gebruik van organische oplosmiddelen zoals fenol en chloroform om cellen te lyseren, waardoor RNA wordt gescheiden van DNA en eiwitten. RNA lost op in de waterfase en wordt na precipitatie met isopropanol gezuiverd. Bij de magnetische kralenmethode komt RNA vrij via de lysisoplossing, waarbij de silicamatrix of specifieke functionele groepen op de magnetische kralen specifiek RNA adsorberen in een omgeving met een hoog zoutgehalte. Na het wassen, RNA wordt geëlueerd in een zoutarme oplossing.
- In aanvulling, er zijn enkele verschillen in het werkingsproces van de twee:
| Stap | Magnetische kralenmethode | Trizol methode |
| Lysis | Snelle lyse van lysaat (geautomatiseerd) | Handmatig malen/verpulveren + Trizol-lyse |
| Verschillend | Magnetische kralen adsorbeerden RNA en magnetische framescheiding | Centrifugale stratificatie (waterige/organische fase) |
| Wassen | De magnetische kralen werden gewassen met ethanol/buffer met hoog zoutgehalte | 75% Om het neerslag te reinigen werd ethanol gebruikt |
| Herstellen | Bufferelutie met laag zoutgehalte | Neerslag van isopropanol + drogen aan de lucht |
| Tijd | 40-60 notulen (volledig automatisch) | 40-60 notulen (volledig automatisch) |
- Het kwaliteitsverschil van RNA geëxtraheerd door de twee methoden:
Zuiverheid:
Trizol-methode: OD260/280≈1,8-2,0, die gemakkelijk wordt aangetast door fenolresiduen of eiwitverontreiniging.
Magnetische kralenmethode: hogere zuiverheid (OD260/280 is vaak>1.9), met minder onzuiverheidsresidu.、
Geval: Een klant gebruikte de Trizol-methode en de magnetische kraalmethode om cel-RNA handmatig uit hechtende neuro2A-cellen te extraheren.
Voordat cel-RNA wordt geëxtraheerd, de componenten werden geteld om fouten te verminderen, en de resultaten zijn als volgt
| Steekproef | Aantal cellen |
| 1-1 | 4.11E6 |
| 2-1 | 5.93E6 |
| 3-1 | 6.98E5 |
| 1-2 | 4.35E6 |
| 2-2 | 5.72E6 |
| 3-2 | 6.82E5 |
Vervolgens werden de Trizol-methode en de magnetische kralenmethode gebruikt om de monsters handmatig te extraheren, en de resultaten zijn als volgt
| Steekproef | Methode | A260/A280 | A260/A230 | Conc.(van/uL) | EB | Opbrengst(uG) |
| 1-1 | Mag-kralen | 2.093 | 2.222 | 2742.5 | 50uL | 137.125 |
| 2-1 | 2.072 | 2.080 | 2835.4 | 141.77 | ||
| 3-1 | 2.038 | 2.001 | 470.08 | 23.504 | ||
| 1-2 | Trizol | 1.792 | 0.587 | 331.68 | 100uL | 33.168 |
| 2-2 | 1.728 | 0.655 | 374.68 | 37.468 | ||
| 3-2 | 1.650 | 0.618 | 107.72 | 10.772 |
Qua rendement, de magnetische kraalmethode presteert aanzienlijk beter dan de Trizol-methode in alle monsters, vooral in monsters 1 En 2, waar de opbrengst groter is dan 100ug, vergeleken met 30-40ug voor de Trizol-methode. Dit geeft aan dat de magnetische parelmethode een hogere extractie-efficiëntie biedt.
In termen van zuiverheid, de A260/A280- en A260/A230-waarden van het RNA geëxtraheerd met de magnetische parelmethode liggen beide hierboven 2, voldoen aan hoogwaardige RNA-normen. In tegenstelling, de Trizol-methode levert RNA op met een lagere zuiverheid, met A260/A280-waarden variërend van 1.6 naar 1.7, wat wijst op onvolledige eiwitverwijdering. Aanvullend, De A260/A230-waarden staan hieronder 0.7, wat mogelijke resterende organische of zoutverbindingen suggereert.
Algemeen, de magnetische kralenmethode blinkt uit in dit experiment, hoge opbrengst bieden, hoge zuiverheid, en bedieningsgemak, waardoor het superieur is aan de traditionele Trizol-methode en ideaal is voor stroomafwaartse experimenten die hoge kwaliteit vereisen. Het geëxtraheerde RNA zal worden gebruikt in qPCR-experimenten om veranderingen in genexpressie te onderzoeken.
Bovendien, de magnetische kralenmethode biedt extra voordelen, zoals automatisering voor monsters met hoge doorvoer (zoals platen met 96 putjes), bloed, speeksel, en andere gemakkelijk te verwerken monsters, en sterke compatibiliteit, waardoor het bijzonder geschikt is voor klinische of grootschalige screening.
Samenvatting: Kies voor de Trizol-methode als u met complexe monsters werkt (zoals weefsels die rijk zijn aan polysachariden en polyfenolen) en wanneer budgettaire beperkingen een probleem vormen. Kies de magnetische parelmethode voor een hoge doorvoer, geautomatiseerd, en snelle extractie, of wanneer de nadruk ligt op zuiverheid en veiligheid (zoals in de klinische diagnostiek). Trend: Vanwege de hoge standaardisatie, de magnetische kralenmethode wordt steeds populairder, vooral in de precisiegeneeskunde.
Lnjnbio Universeel klein RNA-extractiereagens (magnetische kralenmethode)
Leverancier
Shanghai Lingjun Biotechnologie Co., Ltd.werd opgericht in 2016 dat een professionele fabrikant is van biomagnetische materialen en reagentia voor nucleïnezuurextractie.
We hebben een rijke ervaring in de extractie en zuivering van nucleïnezuren, eiwit zuivering, cel scheiding, chemiluminescentie, en andere technische gebieden.
Onze producten worden op veel gebieden veel gebruikt, zoals medische testen, genetische testen, universitair onderzoek, genetische veredeling, enzovoort. Wij leveren niet alleen producten, maar kunnen ook OEM ondernemen, ODM, en andere behoeften. Als u een gerelateerde behoefte heeft, Neem gerust contact met ons op .
