Apakah kelebihan kaedah manik magnetik untuk pengekstrakan RNA berbanding kaedah Trizol?

1.Untuk memahami perbezaan antara kedua-dua kaedah, adalah penting untuk memahami prinsip mereka terlebih dahulu:

 Kaedah Trizol melibatkan penggunaan pelarut organik seperti fenol dan kloroform untuk melisiskan sel, dengan itu memisahkan RNA daripada DNA dan protein. RNA larut dalam fasa akueus dan disucikan selepas pemendakan dengan isopropanol. Kaedah manik magnet membebaskan RNA melalui larutan lisis, di mana matriks silika atau kumpulan berfungsi tertentu pada manik magnetik secara khusus menyerap RNA dalam persekitaran garam tinggi. Selepas mencuci, RNA dicairkan dalam larutan garam rendah.

• Selain itu, terdapat beberapa perbezaan dalam proses operasi kedua-duanya:

Langkah	Kaedah manik magnet	Trizol kaedah
Lysis	Lisis cepat lisat (automatik)	Pengisaran/penumbuk manual + Lisis Trizol
Berpisah	Manik magnet terjerap RNA dan pemisahan bingkai magnetik	Stratifikasi emparan (fasa akueus/organik)
Basuh	Manik magnet telah dibasuh dengan etanol/penampan garam tinggi	75% etanol digunakan untuk membersihkan mendakan
Pulih	Elusi penimbal garam rendah	Pemendakan Isopropanol + pengeringan udara
Masa	40-60 minit (automatik sepenuhnya)	40-60 minit (automatik sepenuhnya)

• Perbezaan kualiti RNA yang diekstrak oleh kedua-dua kaedah:

 Kesucian:

Kaedah Trizol: OD260/280≈1.8-2.0, yang mudah dipengaruhi oleh sisa fenol atau pencemaran protein.

Kaedah manik magnet: kesucian yang lebih tinggi (OD260/280 selalunya>1.9), dengan kurang sisa kekotoran.、

Kes: Seorang pelanggan menggunakan kaedah Trizol dan kaedah manik magnetik untuk mengekstrak RNA sel secara manual daripada sel yang melekat neuro2A.

Sebelum mengekstrak RNA sel, komponen dikira untuk mengurangkan ralat, dan hasilnya adalah seperti berikut

Sampel	Kiraan sel
1-1	4.11E6
2-1	5.93E6
3-1	6.98E5
1-2	4.35E6
2-2	5.72E6
3-2	6.82E5

Kemudian kaedah Trizol dan kaedah manik magnet digunakan untuk mengekstrak sampel secara manual, dan hasilnya adalah seperti berikut

Sampel	Kaedah	A260/A280	A260/A230	Conc.(daripada/uL)	EB	hasil（ug）
1-1	Mag-manik	2.093	2.222	2742.5	50uL	137.125
2-1		2.072	2.080	2835.4		141.77
3-1		2.038	2.001	470.08		23.504
1-2	Trizol	1.792	0.587	331.68	100uL	33.168
2-2		1.728	0.655	374.68		37.468
3-2		1.650	0.618	107.72		10.772

Dari segi hasil, kaedah manik magnet dengan ketara mengatasi kaedah Trizol merentas semua sampel, terutamanya dalam sampel 1 dan 2, di mana hasil melebihi 100ug, berbanding 30-40ug untuk kaedah Trizol. Ini menunjukkan bahawa kaedah manik magnet menawarkan kecekapan pengekstrakan yang lebih tinggi.

Dari segi kesucian, nilai A260/A280 dan A260/A230 bagi RNA yang diekstrak oleh kaedah manik magnet kedua-duanya di atas 2, memenuhi piawaian RNA berkualiti tinggi. Sebaliknya, kaedah Trizol menghasilkan RNA dengan ketulenan yang lebih rendah, dengan nilai A260/A280 antara 1.6 kepada 1.7, menunjukkan penyingkiran protein yang tidak lengkap. Selain itu, Nilai A260/A230 adalah di bawah 0.7, mencadangkan kemungkinan sisa sebatian organik atau garam.

 Keseluruhannya, kaedah manik magnet cemerlang dalam eksperimen ini, menawarkan hasil yang tinggi, kesucian yang tinggi, dan kemudahan operasi, menjadikannya lebih baik daripada kaedah Trizol tradisional dan sesuai untuk eksperimen hiliran yang memerlukan kualiti tinggi. RNA yang diekstrak akan digunakan dalam eksperimen qPCR untuk menyiasat perubahan ekspresi gen.

 Lebih-lebih lagi, kaedah manik magnet menawarkan kelebihan tambahan, seperti automasi untuk sampel berkemampuan tinggi (seperti plat 96-telaga), darah, air liur, dan sampel lain yang mudah diproses, dan keserasian yang kuat, menjadikannya sangat sesuai untuk pemeriksaan klinikal atau berskala besar.

Ringkasan: Pilih kaedah Trizol apabila berurusan dengan sampel yang kompleks (seperti tisu yang kaya dengan polisakarida dan polifenol) dan apabila kekangan belanjawan menjadi kebimbangan. Pilih kaedah manik magnetik untuk pemprosesan tinggi, automatik, dan pengekstrakan cepat, atau apabila memberi tumpuan kepada kesucian dan keselamatan (seperti dalam diagnostik klinikal). Trend: Oleh kerana piawaiannya yang tinggi, kaedah manik magnet semakin popular, terutamanya dalam perubatan ketepatan.

Lnjnbio Reagen pengekstrakan RNA kecil universal (kaedah manik magnetik)

Pembekal

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.ditubuhkan pada 2016 yang merupakan pengilang profesional bahan biomagnet dan reagen pengekstrakan asid nukleik.

Kami mempunyai pengalaman yang kaya dalam pengekstrakan dan penulenan asid nukleik, penulenan protein, pemisahan sel, chemiluminescence, dan bidang teknikal yang lain.

Produk kami digunakan secara meluas dalam pelbagai bidang, seperti ujian perubatan, ujian genetik, penyelidikan universiti, pembiakan genetik, dan seterusnya. Kami bukan sahaja menyediakan produk tetapi juga boleh menjalankan OEM, ODM, dan keperluan lain. Jika anda mempunyai keperluan yang berkaitan, sila hubungi kami .