Fabricante profesional de perlas biomagnéticas
¿Cuáles son las ventajas del método de perlas magnéticas para la extracción de ARN en comparación con el método Trizol??
1.Para comprender las diferencias entre los dos métodos., es esencial comprender primero sus principios:
El método Trizol implica el uso de disolventes orgánicos como fenol y cloroformo para lisar las células., separando así el ARN del ADN y las proteínas.. El ARN se disuelve en la fase acuosa y se purifica tras precipitación con isopropanol.. El método de las perlas magnéticas libera ARN a través de la solución de lisis, donde la matriz de sílice o grupos funcionales específicos de las perlas magnéticas adsorben específicamente el ARN en un ambiente con alto contenido de sal. Después del lavado, El ARN se eluye en una solución baja en sal..
- Además, Hay algunas diferencias en el proceso de operación de los dos.:
| Paso | Método de cuentas magnéticas | Trizol método |
| lisis | Lisis rápida del lisado. (automatizado) | Molienda/pulverización manual + Lisis de trizol |
| Separado | Perlas magnéticas adsorbieron ARN y separación de marcos magnéticos. | Estratificación centrífuga (fase acuosa/orgánica) |
| Lavar | Las perlas magnéticas se lavaron con etanol/tampón con alto contenido de sal. | 75% Se utilizó etanol para limpiar el precipitado. |
| Recuperar | Elución con tampón bajo en sal | Precipitación de isopropanol + secado al aire |
| Tiempo | 40-60 minutos (completamente automático) | 40-60 minutos (completamente automático) |
- La diferencia de calidad del ARN extraído por los dos métodos.:
Pureza:
método trizol: OD260/280≈1,8-2,0, que se ve fácilmente afectado por residuos de fenol o contaminación de proteínas.
Método de cuentas magnéticas: mayor pureza (OD260/280 es a menudo>1.9), con menos residuos de impurezas.、
Caso: Un cliente utilizó el método Trizol y el método de perlas magnéticas para extraer manualmente el ARN celular de las células adherentes neuro2A.
Antes de extraer el ARN celular, Los componentes se contaron para reducir errores., y los resultados son los siguientes
| Muestra | recuento de células |
| 1-1 | 4.11E6 |
| 2-1 | 5.93E6 |
| 3-1 | 6.98E5 |
| 1-2 | 4.35E6 |
| 2-2 | 5.72E6 |
| 3-2 | 6.82E5 |
Luego se utilizó el método Trizol y el método de perlas magnéticas para extraer las muestras manualmente., y los resultados son los siguientes
| Muestra | Método | A260/A280 | A260/A230 | concentrado.(de/uL) | EB | Producir(tugramo) |
| 1-1 | cuentas magnéticas | 2.093 | 2.222 | 2742.5 | 50uL | 137.125 |
| 2-1 | 2.072 | 2.080 | 2835.4 | 141.77 | ||
| 3-1 | 2.038 | 2.001 | 470.08 | 23.504 | ||
| 1-2 | Trizol | 1.792 | 0.587 | 331.68 | 100uL | 33.168 |
| 2-2 | 1.728 | 0.655 | 374.68 | 37.468 | ||
| 3-2 | 1.650 | 0.618 | 107.72 | 10.772 |
En términos de rendimiento, el método de perlas magnéticas supera significativamente al método Trizol en todas las muestras, especialmente en muestras 1 y 2, donde el rendimiento supera los 100ug, en comparación con 30-40ug para el método Trizol. Esto indica que el método de perlas magnéticas ofrece una mayor eficiencia de extracción..
En términos de pureza, los valores A260/A280 y A260/A230 del ARN extraído mediante el método de perlas magnéticas están arriba 2, Cumplir con los estándares de ARN de alta calidad.. En contraste, el método Trizol produce ARN con menor pureza, con valores A260/A280 que van desde 1.6 a 1.7, indicando eliminación incompleta de proteínas. Además, Los valores de A260/A230 están por debajo 0.7, sugiriendo posibles compuestos orgánicos o salinos residuales.
En general, el método de las perlas magnéticas sobresale en este experimento, ofreciendo alto rendimiento, alta pureza, y facilidad de operación, lo que lo hace superior al método tradicional Trizol e ideal para experimentos posteriores que requieren alta calidad. El ARN extraído se utilizará en experimentos de qPCR para investigar cambios en la expresión genética..
Además, El método de las perlas magnéticas ofrece ventajas adicionales, como la automatización para muestras de alto rendimiento (como placas de 96 pocillos), sangre, saliva, y otras muestras fácilmente procesadas, y fuerte compatibilidad, haciéndolo particularmente adecuado para la detección clínica o a gran escala.
Resumen: Elija el método Trizol cuando trabaje con muestras complejas (como tejidos ricos en polisacáridos y polifenoles) y cuando las restricciones presupuestarias son una preocupación. Elija el método de perlas magnéticas para un alto rendimiento, automatizado, y extracción rápida, o cuando se centra en la pureza y la seguridad (como en el diagnóstico clínico). Tendencia: Por su alta estandarización, El método de las perlas magnéticas se está volviendo cada vez más popular., especialmente en medicina de precisión.
Reactivo de extracción de ARN pequeño universal Lnjnbio (método de cuentas magnéticas)
Proveedor
Shanghai Lingjun Biotecnología Co., Limitado.se estableció en 2016 que es un fabricante profesional de materiales biomagnéticos y reactivos de extracción de ácidos nucleicos..
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