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Trizol 방법과 비교하여 RNA 추출을 위한 Magnetic Bead 방법의 장점은 무엇입니까??
1.두 방법의 차이점을 이해하려면, 먼저 원칙을 파악하는 것이 중요합니다.:
Trizol 방법은 페놀, 클로로포름과 같은 유기용매를 사용하여 세포를 용해시키는 방법입니다., 이를 통해 DNA와 단백질로부터 RNA를 분리합니다.. RNA는 수성상에 용해되고 이소프로판올로 침전시킨 후 정제됩니다.. 마그네틱 비드 방식은 용해 용액을 통해 RNA를 방출합니다., 여기서 실리카 매트릭스 또는 자기 비드의 특정 기능 그룹은 고염분 환경에서 RNA를 특이적으로 흡착합니다.. 세탁 후, 저염 용액에서 RNA가 용출됩니다..
- 게다가, 두 가지의 작업 과정에는 약간의 차이가 있습니다.:
| 단계 | 마그네틱 비드 방식 | 트리졸 방법 |
| 용해 | 용해물의 신속한 용해 (자동화된) | 수동 분쇄/분쇄 + 트리졸 용해 |
| 분리된 | 자기 비드 흡착 RNA 및 자기 프레임 분리 | 원심층화 (수성/유기상) |
| 씻다 | 자기 비드는 에탄올/고염 완충액으로 세척되었습니다. | 75% 침전물을 청소하기 위해 에탄올을 사용했습니다. |
| 다시 덮다 | 낮은 염분 완충 용출 | 이소프로판올 침전 + 공기 건조 |
| 시간 | 40-60 분 (완전 자동) | 40-60 분 (완전 자동) |
- 두 가지 방법으로 추출한 RNA의 품질 차이:
청정:
트리졸법: OD260/280≒1.8-2.0, 페놀 잔류물이나 단백질 오염에 쉽게 영향을 받음.
마그네틱 비드 방식: 더 높은 순도 (OD260/280은 종종>1.9), 불순물 잔류량이 적습니다.、
사례: 고객은 Trizol 방법과 Magnetic Bead 방법을 사용하여 부착세포 Neuro2A에서 세포 RNA를 수동으로 추출했습니다..
세포 RNA 추출 전, 오류를 줄이기 위해 구성요소를 계산했습니다., 결과는 다음과 같습니다
| 견본 | 세포수 |
| 1-1 | 4.11E6 |
| 2-1 | 5.93E6 |
| 3-1 | 6.98E5 |
| 1-2 | 4.35E6 |
| 2-2 | 5.72E6 |
| 3-2 | 6.82E5 |
그런 다음 Trizol 방법과 자기 비드 방법을 사용하여 수동으로 샘플을 추출했습니다., 결과는 다음과 같습니다
| 견본 | 방법 | A260/A280 | A260/A230 | 농도.(/uL) | EB | 생산하다（유g) |
| 1-1 | 자기구슬 | 2.093 | 2.222 | 2742.5 | 50uL | 137.125 |
| 2-1 | 2.072 | 2.080 | 2835.4 | 141.77 | ||
| 3-1 | 2.038 | 2.001 | 470.08 | 23.504 | ||
| 1-2 | 트리졸 | 1.792 | 0.587 | 331.68 | 100uL | 33.168 |
| 2-2 | 1.728 | 0.655 | 374.68 | 37.468 | ||
| 3-2 | 1.650 | 0.618 | 107.72 | 10.772 |
수익률 측면에서, 자기 비드 방법은 모든 샘플에서 Trizol 방법보다 훨씬 뛰어난 성능을 발휘합니다., 특히 샘플에서 1 그리고 2, 생산량이 100ug를 초과하는 경우, Trizol 방법의 30-40ug와 비교. 이는 마그네틱 비드 방식이 추출 효율이 더 높다는 것을 의미합니다..
순도면에서는, 마그네틱 비드법으로 추출한 RNA의 A260/A280, A260/A230 값은 모두 위와 같습니다. 2, 고품질 RNA 표준 충족. 대조적으로, Trizol 방법은 순도가 낮은 RNA를 생성합니다., A260/A280 값 범위는 다음과 같습니다. 1.6 에게 1.7, 불완전한 단백질 제거를 나타냄. 추가적으로, A260/A230 값은 아래와 같습니다. 0.7, 가능한 잔류 유기 또는 염 화합물을 제안.
전반적인, 이 실험에서는 자기 비드 방법이 탁월합니다., 높은 수익률 제공, 고순도, 그리고 조작의 용이성, 기존 Trizol 방법보다 우수하며 고품질이 요구되는 다운스트림 실험에 이상적입니다.. 추출된 RNA는 qPCR 실험에 사용되어 유전자 발현 변화를 조사합니다..
게다가, 자기 비드 방식은 추가적인 이점을 제공합니다., 처리량이 많은 시료를 위한 자동화 등 (96웰 플레이트처럼), 피, 타액, 및 기타 쉽게 처리되는 샘플, 강력한 호환성, 임상 또는 대규모 스크리닝에 특히 적합합니다..
요약: 복잡한 시료를 처리할 때 Trizol 방법을 선택하세요 (다당류와 폴리페놀이 풍부한 조직과 같은) 예산 제약이 우려되는 경우. 높은 처리량을 위해 자기 비드 방식을 선택하세요, 자동화된, 그리고 빠른 추출, 또는 순도와 안전에 중점을 둘 때 (임상 진단과 같은). 경향: 높은 표준화로 인해, 자기 비드 방식이 점점 대중화되고 있습니다., 특히 정밀의학 분야.
Lnjnbio Universal small RNA 추출시약 (자기비드 방식)
공급자
상하이 링쥔 생명공학 유한회사, 주식회사에 설립되었습니다 2016 생체자성재료 및 핵산추출시약 전문제조업체입니다..
핵산 추출 및 정제 분야에서 풍부한 경험을 보유하고 있습니다., 단백질 정제, 세포 분리, 화학발광, 및 기타 기술 분야.
우리의 제품은 많은 분야에서 널리 사용됩니다., 의료 테스트와 같은, 유전자 검사, 대학 연구, 유전자 육종, 등. 우리는 제품을 제공할 뿐만 아니라 OEM도 수행할 수 있습니다., ODM, 그리고 다른 필요. 관련된 필요사항이 있는 경우, 저희에게 연락하게 자유롭게 느끼십시오 .
