டிரிசோல் முறையுடன் ஒப்பிடும்போது ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுப்பதற்கான காந்த மணி முறையின் நன்மைகள் என்ன??

1.இரண்டு முறைகளுக்கு இடையிலான வேறுபாடுகளைப் புரிந்து கொள்ள, முதலில் அவர்களின் கொள்கைகளைப் புரிந்துகொள்வது அவசியம்:

 டிரிசோல் முறையானது செல்களை லைஸ் செய்ய பீனால் மற்றும் குளோரோஃபார்ம் போன்ற கரிம கரைப்பான்களைப் பயன்படுத்துகிறது, இதன் மூலம் டிஎன்ஏ மற்றும் புரதங்களிலிருந்து ஆர்என்ஏவை பிரிக்கிறது. ஆர்என்ஏ அக்வஸ் கட்டத்தில் கரைகிறது மற்றும் ஐசோப்ரோபனோல் மூலம் மழைப்பொழிவுக்குப் பிறகு சுத்திகரிக்கப்படுகிறது. காந்த மணி முறையானது லிசிஸ் கரைசல் மூலம் ஆர்என்ஏவை வெளியிடுகிறது, காந்த மணிகளில் உள்ள சிலிக்கா அணி அல்லது குறிப்பிட்ட செயல்பாட்டுக் குழுக்கள் குறிப்பாக அதிக உப்புச் சூழலில் ஆர்என்ஏவை உறிஞ்சும். கழுவிய பின், RNA குறைந்த உப்பு கரைசலில் நீக்கப்படுகிறது.

• கூடுதலாக, இரண்டின் செயல்பாட்டு செயல்பாட்டில் சில வேறுபாடுகள் உள்ளன:

படி	காந்த மணி முறை	டிரிசோல் முறை
லிசிஸ்	லைசேட்டின் விரைவான சிதைவு (தானியங்கி)	கைமுறையாக அரைத்தல்/பொடித்தல் + டிரிசோல் சிதைவு
தனி	காந்த மணிகள் ஆர்.என்.ஏ மற்றும் காந்த சட்ட பிரிவை உறிஞ்சும்	மையவிலக்கு அடுக்கு (நீர்நிலை/கரிம நிலை)
கழுவவும்	காந்த மணிகள் எத்தனால்/அதிக உப்பு தாங்கல் மூலம் கழுவப்பட்டன	75% வீழ்படிவை சுத்தம் செய்ய எத்தனால் பயன்படுத்தப்பட்டது
மீட்கவும்	குறைந்த உப்பு தாங்கல் நீக்கம்	ஐசோப்ரோபனோல் மழைப்பொழிவு + காற்று உலர்த்துதல்
நேரம்	40-60 நிமிடங்கள் (முற்றிலும் தானியங்கி)	40-60 நிமிடங்கள் (முற்றிலும் தானியங்கி)

• இரண்டு முறைகளால் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட RNA இன் தர வேறுபாடு:

 தூய்மை:

டிரிசோல் முறை: OD260/280≈1.8-2.0, இது பீனால் எச்சம் அல்லது புரத மாசுபாட்டால் எளிதில் பாதிக்கப்படுகிறது.

காந்த மணி முறை: அதிக தூய்மை (OD260/280 அடிக்கடி உள்ளது>1.9), குறைந்த தூய்மையற்ற எச்சத்துடன்.、

வழக்கு: ஒரு வாடிக்கையாளர் டிரைசோல் முறை மற்றும் காந்த மணி முறை ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி செல் ஆர்என்ஏவை ஒட்டிய செல்கள் நியூரோ2ஏவிலிருந்து கைமுறையாகப் பிரித்தெடுத்தார்..

செல் ஆர்என்ஏவை பிரித்தெடுக்கும் முன், பிழைகளைக் குறைக்க கூறுகள் கணக்கிடப்பட்டன, மற்றும் முடிவுகள் பின்வருமாறு

மாதிரி	செல் எண்ணிக்கை
1-1	4.11E6
2-1	5.93E6
3-1	6.98E5
1-2	4.35E6
2-2	5.72E6
3-2	6.82E5

பின்னர் கைமுறையாக மாதிரிகளை பிரித்தெடுக்க டிரிசோல் முறை மற்றும் காந்த மணி முறை பயன்படுத்தப்பட்டது, மற்றும் முடிவுகள் பின்வருமாறு

மாதிரி	முறை	A260/A280	A260/A230	ஒப்பந்தம்.(of/uL)	EB	மகசூல்(ug)
1-1	மாக்-மணிகள்	2.093	2.222	2742.5	50uL	137.125
2-1		2.072	2.080	2835.4		141.77
3-1		2.038	2.001	470.08		23.504
1-2	டிரிசோல்	1.792	0.587	331.68	100uL	33.168
2-2		1.728	0.655	374.68		37.468
3-2		1.650	0.618	107.72		10.772

மகசூல் அடிப்படையில், காந்த மணி முறையானது அனைத்து மாதிரிகளிலும் ட்ரைசோல் முறையைக் கணிசமாக விஞ்சுகிறது, குறிப்பாக மாதிரிகளில் 1 மற்றும் 2, மகசூல் 100ugக்கு மேல் இருக்கும், Trizol முறைக்கு 30-40ug உடன் ஒப்பிடும்போது. காந்த மணி முறை அதிக பிரித்தெடுத்தல் திறனை வழங்குகிறது என்பதை இது குறிக்கிறது.

தூய்மையின் அடிப்படையில், காந்த மணி முறை மூலம் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட ஆர்என்ஏவின் A260/A280 மற்றும் A260/A230 மதிப்புகள் இரண்டும் மேலே உள்ளன 2, உயர்தர RNA தரநிலைகளை பூர்த்தி செய்தல். மாறாக, டிரைசோல் முறை குறைந்த தூய்மையுடன் RNA ஐ அளிக்கிறது, A260/A280 மதிப்புகள் வரை 1.6 செய்ய 1.7, முழுமையடையாத புரதத்தை அகற்றுவதைக் குறிக்கிறது. கூடுதலாக, A260/A230 மதிப்புகள் கீழே உள்ளன 0.7, சாத்தியமான எஞ்சிய கரிம அல்லது உப்பு கலவைகளை பரிந்துரைக்கிறது.

 ஒட்டுமொத்த, இந்த சோதனையில் காந்த மணி முறை சிறந்து விளங்குகிறது, அதிக மகசூல் அளிக்கிறது, உயர் தூய்மை, மற்றும் செயல்பாட்டின் எளிமை, இது பாரம்பரிய ட்ரைசோல் முறையை விட மேம்பட்டதாகவும், உயர் தரம் தேவைப்படும் கீழ்நிலை சோதனைகளுக்கு ஏற்றதாகவும் உள்ளது. பிரித்தெடுக்கப்பட்ட RNA மரபணு வெளிப்பாடு மாற்றங்களை ஆராய qPCR சோதனைகளில் பயன்படுத்தப்படும்.

 மேலும், காந்த மணி முறை கூடுதல் நன்மைகளை வழங்குகிறது, உயர்-செயல்திறன் மாதிரிகளுக்கான ஆட்டோமேஷன் போன்றவை (96-கிணறு தட்டுகள் போன்றவை), இரத்தம், உமிழ்நீர், மற்றும் பிற எளிதில் செயலாக்கப்பட்ட மாதிரிகள், மற்றும் வலுவான பொருந்தக்கூடிய தன்மை, மருத்துவ அல்லது பெரிய அளவிலான திரையிடலுக்கு இது மிகவும் பொருத்தமானது.

சுருக்கம்: சிக்கலான மாதிரிகளைக் கையாளும் போது ட்ரைசோல் முறையைத் தேர்ந்தெடுக்கவும் (பாலிசாக்கரைடுகள் மற்றும் பாலிபினால்கள் நிறைந்த திசுக்கள் போன்றவை) மற்றும் பட்ஜெட் கட்டுப்பாடுகள் ஒரு கவலையாக இருக்கும் போது. உயர்-செயல்திறனுக்கான காந்த மணி முறையைத் தேர்வு செய்யவும், தானியங்கி, மற்றும் விரைவான பிரித்தெடுத்தல், அல்லது தூய்மை மற்றும் பாதுகாப்பில் கவனம் செலுத்தும் போது (மருத்துவ நோயறிதல் போன்றவை). போக்கு: அதன் உயர் தரநிலை காரணமாக, காந்த மணி முறை மிகவும் பிரபலமாகி வருகிறது, குறிப்பாக துல்லியமான மருத்துவத்தில்.

Lnjnbio யுனிவர்சல் சிறிய RNA பிரித்தெடுத்தல் மறுஉருவாக்கம் (காந்த மணி முறை)

சப்ளையர்

ஷாங்காய் லிங்ஜுன் பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட்இல் நிறுவப்பட்டது 2016 உயிர் காந்த பொருட்கள் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் உலைகளின் தொழில்முறை உற்பத்தியாளர்.

நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு ஆகியவற்றில் எங்களுக்கு சிறந்த அனுபவம் உள்ளது, புரத சுத்திகரிப்பு, செல் பிரிப்பு, இரசாயன ஒளிர்வு, மற்றும் பிற தொழில்நுட்ப துறைகள்.

எங்கள் தயாரிப்புகள் பல துறைகளில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, மருத்துவ பரிசோதனை போன்றவை, மரபணு சோதனை, பல்கலைக்கழக ஆராய்ச்சி, மரபணு இனப்பெருக்கம், மற்றும் பல. நாங்கள் தயாரிப்புகளை வழங்குவது மட்டுமல்லாமல் OEM ஐயும் மேற்கொள்ள முடியும், ODM, மற்றும் பிற தேவைகள். உங்களுக்கு தொடர்புடைய தேவை இருந்தால், தயவு செய்து எங்களை தொடர்பு கொள்ளவும் .