டிஜிட்டல் PCR தொழில்நுட்பம்:கொள்கைகள், செயல்பாடுகள், மற்றும் விண்ணப்பங்கள்

1. டிஜிட்டல் PCR இன் பரிசோதனைக் கோட்பாடு

டிஜிட்டல் பிசிஆர் (dPCR) ஒரு மேம்பட்ட நியூக்ளிக் அமில மூலக்கூறு முழுமையான அளவீட்டு நுட்பமாகும். PCR பெருக்கத்துக்காக மாதிரியை அதிக எண்ணிக்கையிலான சுயேச்சையான மைக்ரோ-ரியாக்ஷன் யூனிட்களாகப் பிரிப்பதில் இதன் மையக்கரு உள்ளது.. ஒவ்வொரு மைக்ரோ-ரியாக்ஷன் யூனிட்டும் ஒன்று அல்லது பூஜ்ஜிய இலக்கு மூலக்கூறுகளைக் கொண்டிருக்கலாம். PCR பெருக்கத்திற்குப் பிறகு, ஒவ்வொரு அலகிலும் ஒளிரும் சமிக்ஞைகள் கண்டறியப்படுகின்றன. இறுதியில், இலக்கு மூலக்கூறுகளின் முழுமையான எண்ணிக்கை பாய்சன் விநியோகக் கொள்கையின் அடிப்படையில் கணக்கிடப்படுகிறது. பாரம்பரியத்துடன் ஒப்பிடும்போது நிகழ்நேர ஃப்ளோரசன்ட் அளவு PCR (qPCR), டிஜிட்டல் PCR நிலையான வளைவில் தங்கியிருக்காது மற்றும் முழுமையான அளவீட்டை நேரடியாகச் செய்ய முடியும்.

2. டிஜிட்டல் PCR இன் செயல்பாட்டு படிகள்

மாதிரி தயாரிப்பு: முதலில், மரபணு டிஎன்ஏ போன்ற நியூக்ளிக் அமிலங்கள் (gDNA) அல்லது எம்ஆர்என்ஏ இலக்கு திசுக்கள் அல்லது மாதிரிகளிலிருந்து பிரித்தெடுக்கப்படுகிறது, மற்றும் mRNA ஆனது cDNA ஆக மாற்றப்படுகிறது.

எதிர்வினை அமைப்பு தயாரித்தல்: பிரித்தெடுக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலங்களை மாஸ்டர் கலவையுடன் கலக்கவும், இலக்கு சார்ந்த ப்ரைமர்கள், மற்றும் ஆய்வுகள். துளி டிஜிட்டல் PCR க்கு (ddPCR), துளி தலைமுறை எண்ணெய் தேவைப்படுகிறது.

துளி தலைமுறை: தயாரிக்கப்பட்ட எதிர்வினை கலவையானது ஒரு துளி ஜெனரேட்டர் மூலம் செயலாக்கப்பட்டு ஆயிரக்கணக்கான நானோலிட்டர் அளவிலான நீர்த்துளிகளை உருவாக்குகிறது.. ஒவ்வொரு துளியும் ஒன்று அல்லது பூஜ்ஜிய இலக்கு மூலக்கூறுகளைக் கொண்டிருக்கலாம்.

பிசிஆர் பெருக்கம்: நீர்த்துளிகள் செய்யப்பட்ட எதிர்வினைத் தட்டு ஒரு PCR கருவியில் பெருக்கத்திற்காக வைக்கப்படுகிறது. பெருக்கத்தின் போது, இலக்கு மூலக்கூறுகள் பெருக்கப்படுகின்றன, மற்றும் ஒளிரும் சமிக்ஞைகள் படிப்படியாக தோன்றும்.

துளி கண்டறிதல்: பெருக்கத்திற்குப் பிறகு, ஒவ்வொரு துளியின் ஒளிரும் சிக்னல்களைக் கண்டறிய வினைத் தட்டு ஒரு துளி ரீடரில் வைக்கப்படுகிறது.

தரவு பகுப்பாய்வு: மென்பொருள் ஒவ்வொரு துளியின் ஒளிரும் சமிக்ஞைகளை தானாகவே பகுப்பாய்வு செய்கிறது மற்றும் நேர்மறை நீர்த்துளிகள் மற்றும் பாய்சன் விநியோகத்தின் விகிதத்தின் அடிப்படையில் இலக்கு மூலக்கூறுகளின் முழுமையான எண்ணிக்கையைக் கணக்கிடுகிறது..

3. டிஜிட்டல் PCR இன் முடிவு பகுப்பாய்வு

டிஜிட்டல் PCR சோதனைகளில், முடிவு பகுப்பாய்வு முக்கியமாக நீர்த்துளிகளிலிருந்து ஒளிரும் சமிக்ஞைகளைக் கண்டறிவதில் தங்கியுள்ளது. ஒவ்வொரு துளியின் ஒளிரும் சமிக்ஞைகள் நேர்மறை என வகைப்படுத்தப்படுகின்றன (இலக்கு மூலக்கூறுகள் உள்ளன) அல்லது எதிர்மறை (இலக்கு மூலக்கூறுகள் இல்லை). நேர்மறை நீர்த்துளிகளின் எண்ணிக்கையை எண்ணி, பாய்சன் விநியோக சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், மாதிரியில் உள்ள இலக்கு மூலக்கூறுகளின் முழுமையான நகல் எண்ணைக் கணக்கிடலாம். கூடுதலாக, டிஜிட்டல் PCR தொழில்நுட்பம் மிகவும் உணர்திறன் மற்றும் குறிப்பிட்டது, குறைந்த மிகுதியான இலக்கு மூலக்கூறுகளைக் கண்டறியும் திறன் கொண்டது, மற்றும் பெருக்கத் திறனால் பாதிக்கப்படாது.

4. டிஜிட்டல் PCR இன் பயன்பாடுகள்

டிஜிட்டல் PCR தொழில்நுட்பம் பல்வேறு துறைகளில் பரவலான பயன்பாடுகளைக் கொண்டுள்ளது.

மரபணு மாற்றத்தைக் கண்டறிதல்: இது குறைந்த அளவிலான பிறழ்வுகளைக் கண்டறிய முடியும், ஆரம்பகால புற்றுநோய் பரிசோதனை மற்றும் கண்காணிப்புக்கு ஏற்றது.

எண் மாறுபாடு கண்டறிதலை நகலெடுக்கவும்: மரபணுவில் உள்ள நகல் எண் மாறுபாடுகளை பகுப்பாய்வு செய்யப் பயன்படுகிறது, குரோமோசோமால் அசாதாரணங்கள் போன்றவை.

வைரஸ் மற்றும் நுண்ணுயிரிகளைக் கண்டறிதல்: இது வைரஸ் சுமைகள் மற்றும் நுண்ணுயிர் எண்களை துல்லியமாக கண்டறிய முடியும், தொற்று நோய்களைக் கண்டறிவதற்கும் கண்காணிப்பதற்கும் ஏற்றது.

மரபணு மாற்றப்பட்ட உணவு கண்டறிதல்: உணவில் மரபணு மாற்றப்பட்ட கூறுகள் இருப்பதைக் கண்டறியப் பயன்படுகிறது.

ஒற்றை செல் ஆராய்ச்சி: இது ஒற்றை உயிரணுக்களிலிருந்து மரபணு வெளிப்பாடு மற்றும் புரத அளவைக் கண்டறிய முடியும்.

அடுத்த தலைமுறை வரிசைமுறை (என்ஜிஎஸ்) சரிபார்த்தல்: NGS வரிசைமுறை முடிவுகளின் துல்லியம் மற்றும் நம்பகத்தன்மையை சரிபார்க்கப் பயன்படுகிறது.

சுருக்கமாக, டிஜிட்டல் PCR தொழில்நுட்பம், அதன் அதிக உணர்திறன் கொண்டது, துல்லியம், மற்றும் முழுமையான அளவீட்டு நன்மைகள், உயிரியல் மருத்துவ ஆராய்ச்சி மற்றும் மருத்துவ நோயறிதலில் பெரும் ஆற்றலைக் காட்டியுள்ளது. தொழில்நுட்பம் வளர்ந்து செலவுகள் குறையும், டிஜிட்டல் PCR பல துறைகளில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் என்று எதிர்பார்க்கப்படுகிறது.

சப்ளையர்

ஷாங்காய் லிங்ஜுன் பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட்இல் நிறுவப்பட்டது 2016 உயிர் காந்த பொருட்கள் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் உலைகளின் தொழில்முறை உற்பத்தியாளர்.

நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு ஆகியவற்றில் எங்களுக்கு சிறந்த அனுபவம் உள்ளது, புரத சுத்திகரிப்பு, செல் பிரிப்பு, இரசாயன ஒளிர்வு, மற்றும் பிற தொழில்நுட்ப துறைகள்.

எங்கள் தயாரிப்புகள் பல துறைகளில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, மருத்துவ பரிசோதனை போன்றவை, மரபணு சோதனை, பல்கலைக்கழக ஆராய்ச்சி, மரபணு இனப்பெருக்கம், மற்றும் பல. நாங்கள் தயாரிப்புகளை வழங்குவது மட்டுமல்லாமல் OEM ஐயும் மேற்கொள்ள முடியும், ODM, மற்றும் பிற தேவைகள். உங்களுக்கு தொடர்புடைய தேவை இருந்தால், தயவு செய்து எங்களை தொடர்பு கொள்ளவும்sales01@lingjunbio.com.