ডিএনএ নিষ্কাশনে কেন পিএইচ সামঞ্জস্য প্রয়োজন??

ডিএনএ নিষ্কাশনে pH অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ এবং কারণগুলি নিম্নরূপ:

1. ডিএনএ স্থিতিশীলতা বজায় রাখা

এর চেয়ে বেশি pH সহ সমাধানে DNA তুলনামূলকভাবে স্থিতিশীল থাকে 5 এবং এর চেয়ে কম 9. যখন pH মাত্রাতিরিক্ত হয় (যেমন, উপরে 12) বা কম (যেমন, নীচে 3), ডিএনএ ডাবল স্ট্র্যান্ডের মধ্যে হাইড্রোজেন বন্ধন বিচ্ছিন্ন হবে, ডিএনএ বিকৃতকরণের দিকে পরিচালিত করে. যেমন, বাফার II ধারণ করে 0.2 প্লাজমিড ডিএনএ নিষ্কাশনে এম NaOH, একটি সিস্টেম pH এর ফলে 12. 6, যা ক্রোমোজোমাল এবং প্লাজমিড ডিএনএ উভয়েরই বিকৃতকরণকে প্ররোচিত করে. ফলে, পরবর্তী ধাপে পিএইচকে নিরপেক্ষতার সাথে সামঞ্জস্য করা প্রয়োজন. এটি দুটি উদ্দেশ্য পরিবেশন করে: প্রথম, এটি বিকৃত প্লাজমিড ডিএনএকে পুনঃস্থাপন করতে এবং স্থিতিশীল থাকতে দেয়; দ্বিতীয়, এটি জিনোমিক ডিএনএ এবং প্লাজমিড ডিএনএর মধ্যে খণ্ডের আকারের পার্থক্যকে কাজে লাগায় (প্লাজমিড ছোট এবং dsDNA-তে পুনঃস্থাপনের সম্ভাবনা বেশি, যখন gDNA, খুব দীর্ঘ হচ্ছে, সম্পূর্ণরূপে পুনরায় মিলিত হতে পারে না এবং পরিবর্তে জড়িয়ে পড়ে, বাফার III-তে উচ্চ লবণের ঘনত্বের প্রভাবে এসডিএস-প্রোটিন কমপ্লেক্সের সাথে ক্ষরণ).

2. ডিএনএ অবক্ষয় রোধ করা

 EDTA দ্রবণে উপস্থিত Mg²⁺ এবং Ca²⁺ এর মতো ধাতব আয়নের সাথে আবদ্ধ হতে পারে. এই ধাতব আয়নগুলি DNase-এর জন্য কোফ্যাক্টর. EDTA DNase এর কার্যকলাপকে বাধা দেয়, যার ফলে এই ধাতব আয়নগুলিকে চেলেট করে ডিএনএর অবক্ষয় রোধ করে.

3. নিষ্কাশন দক্ষতা অপ্টিমাইজ করা

গবেষণায় দেখা গেছে যে ডিএনএ নিষ্কাশনের জন্য সর্বোত্তম পিএইচ হল 7.4। পিএইচ 7 সহ বাফার করলে ডিএনএ নিষ্কাশনের ফলন সর্বাধিক হয়. 4. এই মান থেকে পিএইচ আরও বিচ্যুত হয়, ডিএনএ নিষ্কাশন ফলন কম. যেমন, পিএইচ-এ ডিএনএ নিষ্কাশন ফলন 7.4 হয় 1.09, 1.03, 1.06, এবং 1.11 pH 7.2 এর গুণে, 7.6, 7.8, এবং 8.0, যথাক্রমে.

চুম্বকীয় জপমালার সাথে নিউক্লিক অ্যাসিড বাইন্ডিং সুবিধা: একটি উপযুক্ত পিএইচ চৌম্বকীয় পুঁতি-ভিত্তিক ডিএনএ নিষ্কাশন পদ্ধতিতে নিউক্লিক অ্যাসিডকে চৌম্বক পুঁতির সাথে বাঁধাই করতে পারে।. একটি উচ্চ-লবণ বাঁধাই বাফার নিউক্লিক অ্যাসিডের নেতিবাচক চার্জ নিরপেক্ষ করতে পারে, নিউক্লিক অ্যাসিড এবং চৌম্বকীয় পুঁতির মধ্যে ইলেক্ট্রোস্ট্যাটিক বিকর্ষণ হ্রাস করা, এর ফলে পুঁতির উপরিভাগে নিউক্লিক অ্যাসিডের শোষণকে সহজতর করে.

4. লাইসোজাইম কার্যকলাপ রক্ষা

গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া থেকে প্লাজমিড ডিএনএ নিষ্কাশনের সময় লাইসোজাইম ব্যবহার করা হয়. লাইসোজাইম একটি গ্লাইকোসাইড হাইড্রোলেজ যা β-1 হাইড্রোলাইজ করতে পারে, 4 পেপটিডোগ্লাইকানে গ্লাইকোসিডিক বন্ধন, G এর কোষ প্রাচীরের প্রধান রাসায়নিক উপাদান⁺ ব্যাকটেরিয়া, যার ফলে একটি lytic প্রভাব exerting. বাফারের pH এর চেয়ে কম হলে লাইসোজাইমের কার্যকলাপ বাধাপ্রাপ্ত হয় 8. অতএব, লাইসোজাইমের কার্যকলাপ নিশ্চিত করার জন্য উপযুক্ত পিএইচ বজায় রাখা অপরিহার্য.

5. ইলুশন দক্ষতা উন্নত করা

ইলিউশন বাফারের pH উল্লেখযোগ্যভাবে DNA ইলুশনের দক্ষতাকে প্রভাবিত করে. ইলুশন বাফারের pH এর মধ্যে বজায় রাখতে হবে 7.0 এবং 8.5 ডিএনএ সম্পূর্ণরূপে নির্গত হয়েছে তা নিশ্চিত করতে. একটি pH যে খুব কম ইলুশন দক্ষতা কমিয়ে দেবে.

সংক্ষেপে, ডিএনএ নিষ্কাশন প্রক্রিয়ায় pH-এর সমন্বয় অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ. এটি শুধুমাত্র ডিএনএর স্থিতিশীলতা বজায় রাখতে এবং অবক্ষয় রোধ করতে সাহায্য করে না বরং নিষ্কাশনের দক্ষতাও অপ্টিমাইজ করে, প্রাসঙ্গিক এনজাইমের কার্যকলাপ রক্ষা করে, এবং নির্গমনের অবস্থাকে অনুকূল করে.

সরবরাহকারী

সাংহাই লিংজুন বায়োটেকনোলজি কো., লিমিটেডসালে প্রতিষ্ঠিত হয় 2016 যা বায়োম্যাগনেটিক উপকরণ এবং নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন বিকারকগুলির একটি পেশাদার প্রস্তুতকারক.

আমাদের নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন সমৃদ্ধ অভিজ্ঞতা আছে, প্রোটিন পরিশোধন, কোষ বিচ্ছেদ, কেমিলুমিনেসেন্স, এবং অন্যান্য প্রযুক্তিগত ক্ষেত্র.

আমাদের পণ্য ব্যাপকভাবে অনেক ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়, যেমন মেডিকেল টেস্টিং, জেনেটিক পরীক্ষা, বিশ্ববিদ্যালয় গবেষণা, জেনেটিক প্রজনন, এবং তাই. আমরা কেবল পণ্য সরবরাহ করি না তবে OEM গ্রহণ করতে পারি, ওডিএম, এবং অন্যান্য প্রয়োজন. আপনি যদি একটি সম্পর্কিত প্রয়োজন আছে, এ আমাদের সাথে যোগাযোগ বিনা দ্বিধায় দয়া করেsales01@lingjunbio.com.