LnjnBio இன் பொருந்தக்கூடிய தன்மையை ஆராய்தல் 22 சுத்திகரிப்பில் தொடர் காந்த மணிகள் பிரிவு

துண்டு அளவு தேர்வு டிஎன்ஏ வரிசைமுறை நூலக தயாரிப்பு மற்றும் குளோனிங் போன்ற மூலக்கூறு உயிரியல் சோதனைகளில் இது ஒரு முக்கியமான அடிப்படை படியாகும்.

வெவ்வேறு நீளங்களின் துண்டுகளின் கலவையிலிருந்து ஒரு குறிப்பிட்ட அளவு வரம்பிற்குள் டிஎன்ஏ துண்டுகளை தனிமைப்படுத்துவதே இதன் முக்கிய நோக்கம்., கீழ்நிலை பயன்பாடுகளை செயல்படுத்துகிறது.

அதன் கொள்கை முதன்மையாக உடல் வேறுபாடுகளை சார்ந்துள்ளது, இரசாயன, அல்லது பல்வேறு அளவுகளில் டிஎன்ஏ மூலக்கூறுகள் மத்தியில் மின் பண்புகள், பிரிப்பு மற்றும் திரையிடலை அடைய இந்த வேறுபாடுகளைப் பயன்படுத்துதல்.

காந்த மணி சுத்திகரிப்பு (திட-கட்ட மீளக்கூடிய அசையாமை, SPRI) தற்போது மிகவும் பரவலாக பயன்படுத்தப்படும் மற்றும் திறமையான முறையாகும், குறிப்பாக உயர்-செயல்திறன் வரிசைமுறையில் (என்ஜிஎஸ்) நூலக தயாரிப்பு.

கொள்கை:

டிஎன்ஏ துண்டு அளவு மற்றும் காந்த மணி பிணைப்பு திறன் ஆகியவற்றுக்கு இடையேயான உறவின் அடிப்படையில்.

பிணைத்தல்:

பாலிஎதிலீன் கிளைகோலின் குறிப்பிட்ட செறிவைச் சேர்க்கவும் (PEG) மற்றும் உப்பு (NaCl) டிஎன்ஏ துண்டு தீர்வுக்கு, பின்னர் மேற்பரப்பில் மாற்றியமைக்கப்பட்ட காந்த மணிகளை அறிமுகப்படுத்துங்கள். அதிக உப்பு சூழலில், டிஎன்ஏ அதன் பாஸ்பேட் முதுகெலும்பை நீரேற்றம் செய்து அம்பலப்படுத்துகிறது, ஹைட்ரோபோபிக் மற்றும் எலக்ட்ரோஸ்டேடிக் இடைவினைகள் மூலம் மணி மேற்பரப்பில் தலைகீழாக உறிஞ்சப்படுகிறது. முக்கிய விஷயம் என்னவென்றால், பெரிய டிஎன்ஏ துண்டுகள் சிறிய துண்டுகளை விட விரைவாகவும் முன்னதாகவும் பிணைக்கப்படுகின்றன.

மழைப்பொழிவு மற்றும் பிரித்தல்:

எதிர்வினைக் குழாயை ஒரு காந்த நிலைப்பாட்டில் வைக்கவும். காந்த மணிகள் (கட்டுப்பட்ட டிஎன்ஏ உடன்) குழாய் சுவரில் ஒட்டிக்கொள்ளும், கட்டுப்படாத கரைசல் மற்றும் சிறிய டிஎன்ஏ துண்டுகளை சூப்பர்நேட்டண்டில் விட்டுச்செல்கிறது.

பெரிய துண்டுகளுக்கு:

PEG/உப்பு கரைசலின் குறைந்த செறிவைச் சேர்க்கவும். பெரிய DNA துண்டுகள் மட்டுமே காந்த மணிகளுடன் பிணைக்கப்படும். மேலதிகாரியை நிராகரிக்கவும் (தேவையற்ற குறுகிய துண்டுகள் கொண்டவை), காந்த மணிகளைத் தக்கவைத்துக்கொள், மற்றும் நீண்ட துண்டுகளை பெற டி.என்.ஏ.

குறுகிய துண்டுகளுக்கு:

பெரும்பாலான டிஎன்ஏவை பிணைக்க முதலில் நடுத்தர செறிவு PEG/உப்பு கரைசலை சேர்க்கவும் (நீண்ட மற்றும் குறுகிய துண்டுகள் உட்பட) காந்த மணிகளுக்கு. மேலதிகாரியை நிராகரிக்கவும், டிஎன்ஏ முற்றிலும் இல்லாமல் இருக்கும். அடுத்து, குறைந்த செறிவு கொண்ட PEG/buffer அல்லது தண்ணீர் கரைசலை சேர்க்கவும். குறுகிய டிஎன்ஏ துண்டுகள் காந்த மணிகளில் இருந்து பிரிந்து செல்லும். கலவையை மீண்டும் காந்த நிலைப்பாட்டில் வைக்கவும். இலக்கு சிறிய துண்டுகள் கொண்ட சூப்பர்நேட்டன்ட் ஆஃப் குழாய், மணிகளுடன் இன்னும் பிணைக்கப்பட்ட பெரிய துண்டுகளை அப்புறப்படுத்துகிறது.

பரிசோதனை விசாரணை:

நாங்கள் வெளிநாட்டு பிராண்ட் ஏ காந்த மணிகளைத் தேர்ந்தெடுத்தோம் (10 மி.கி./மி.லி) மற்றும் எங்கள் நிறுவனத்தின் ஆர்&டி தயாரிப்புகள்: 220011 (50 மி.கி./மி.லி), 220012 (25 மி.கி./மி.லி), 220021 (50 மி.கி./மி.லி), மற்றும் 220022 (25 மி.கி./மி.லி) (அட்டவணை 1). அவற்றின் திடமான உள்ளடக்கம் தரப்படுத்தப்பட்டது 1.2 குறிப்பிட்ட உப்பு செறிவுகள் மற்றும் PEG சதவீதங்களின் கீழ் mg/ml. துண்டு தேர்வுக்கான சுத்திகரிப்பு படிகளைப் பின்பற்றவும், முதல் சுற்று 0.6X சுத்திகரிப்பு செய்யப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து முதல் சுற்றில் இருந்து சூப்பர்நேட்டண்டில் 0.2X சுத்திகரிப்பு இரண்டாவது சுற்று. முடிவுகள் படத்தில் காட்டப்பட்டுள்ளன 1.

அட்டவணை 1: துண்டு தேர்வு பரிசோதனைக்காக தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட காந்த மணிகள்

இல்லை.	1	2	3	4	5	6
மணிகள்	ஏ	220011	220012	220021	220022	220022’

குறிப்பு: 220022′ காந்த மணிகளின் மற்றொரு தொகுதி ஆகும்

முதல் சுற்றில் 0.6X சுத்திகரிப்பு என்று முடிவுகள் காட்டுகின்றன, வெளிநாட்டு A மணிகள், 220011, 220021, 220022 மற்றும் 220022′ 500bpக்கு மேல் வரிசைப்படுத்தப்பட்டன, போது 220012 400bp வரை வரிசைப்படுத்தப்பட்டது; 0.2X பிரிவின் இரண்டாவது சுற்றில் இருந்து, வெளிநாட்டு A மணிகள், 220021, 220022 மற்றும் 220022′ முக்கியமாக 300-500bp வரிசைப்படுத்தப்பட்டது, இதில் 220011 பெரிய துண்டின் காரணமாக சிறிது எச்சம் இருந்தது மேலும் மேம்படுத்தப்பட வேண்டும், போது 220012 உணர்திறன் காரணமாக மேலும் மேம்படுத்தப்பட வேண்டும் 220011 pH க்கு. முக்கிய வரிசையாக்கம் 300-500bp, இதில் 220011 பெரிய பட்டைகள் காரணமாக ஒரு சிறிய எச்சம் உள்ளது, ஒருவேளை காரணமாக 220011 pH க்கு அதிக உணர்திறன் கொண்டது மேலும் மேம்படுத்தப்பட வேண்டும், போது 220012 மீட்டெடுப்பின் முதல் சுற்று அதிகமாக இருப்பதால், உப்பு அயனிகள் மற்றும் PEG ஆகியவற்றின் செறிவை சரியான முறையில் சரிசெய்யலாம் அல்லது வரிசைப்படுத்தும் தொகுதி விகிதத்தை 0.55X ஆக சரிசெய்யலாம். + 0.2X அதே வரிசையாக்க விளைவை அடைய.

மேற்கண்ட ஆய்வில் இருந்து, நம்முடையதைக் காணலாம் 220011, 220012, 220021 மற்றும் 220022 வெளிநாட்டு காந்த மணிகளை மாற்றும் பெரும் ஆற்றல் உள்ளது.

காந்த மணி சுத்திகரிப்பு அதிக செயல்திறன் நன்மைகளைக் கொண்டுள்ளது, தானியங்கி, வேகம் மற்றும் நச்சு எதிர்வினைகள் இல்லை (எத்தனால் போன்றவை), எனவே இது NGS நூலக சுத்திகரிப்புக்கு பரவலாக பயன்படுத்தப்படலாம், PCR தயாரிப்பு சுத்திகரிப்பு, cDNA வரிசையாக்கம் மற்றும் பல.

விஞ்ஞான ஆராய்ச்சியின் மறுஉருவாக்கம் உலைகளின் உயர் நிலைத்தன்மையைப் பொறுத்தது என்பதை நாங்கள் புரிந்துகொள்கிறோம். காந்த மணிகளின் ஒவ்வொரு தொகுதியும் துகள்கள் சீரானதாகவும், செயல்திறன் நிலையானதாகவும் இருப்பதை உறுதிசெய்ய கடுமையான தரக் கட்டுப்பாட்டிற்கு உட்படுகிறது., ஒவ்வொரு சோதனைக்கும் நீங்கள் நிலையான மற்றும் நம்பகமான முடிவுகளைப் பெற முடியும் என்பதை இது உறுதி செய்கிறது. NGS நூலகக் கட்டுமானம் போன்ற பல்வேறு மூலக்கூறு உயிரியல் காட்சிகளில் எங்கள் தயாரிப்புகள் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, செரிமான தயாரிப்பு சுத்திகரிப்பு, டிஎன்ஏ துண்டு வரிசையாக்கம், சிடிஎன்ஏ சுத்திகரிப்பு, முதலியன. அவை இன்றியமையாதவை “ஆல்ரவுண்டர்கள்” உங்கள் ஆய்வகத்தில்.

சப்ளையர்

ஷாங்காய் லிங்ஜுன் பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட்இல் நிறுவப்பட்டது 2016 உயிர் காந்த பொருட்கள் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் உலைகளின் தொழில்முறை உற்பத்தியாளர்.

நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு ஆகியவற்றில் எங்களுக்கு சிறந்த அனுபவம் உள்ளது, புரத சுத்திகரிப்பு, செல் பிரிப்பு, இரசாயன ஒளிர்வு, மற்றும் பிற தொழில்நுட்ப துறைகள்.

எங்கள் தயாரிப்புகள் பல துறைகளில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, மருத்துவ பரிசோதனை போன்றவை, மரபணு சோதனை, பல்கலைக்கழக ஆராய்ச்சி, மரபணு இனப்பெருக்கம், மற்றும் பல. நாங்கள் தயாரிப்புகளை வழங்குவது மட்டுமல்லாமல் OEM ஐயும் மேற்கொள்ள முடியும், ODM, மற்றும் பிற தேவைகள். உங்களுக்கு தொடர்புடைய தேவை இருந்தால், தயவு செய்து எங்களை தொடர்பு கொள்ளவும் .