Infheidhmeacht LnjnBio a Iniúchadh 22 Sraith Coirníní Maighnéadacha Deighilt san Íonú

Roghnú Méid Fragment Is céim bhunúsach ríthábhachtach í i dturgnaimh bhitheolaíocht mhóilíneach cosúil le seicheamhú DNA a ullmhú agus a chlónáil.

Is é a phríomhchuspóir ná blúirí DNA a leithlisiú laistigh de raon méide ar leith ó mheascán de blúirí d’fhaid éagsúla, feidhmchláir iartheachtacha a chumasú.

Braitheann a phrionsabal go príomha ar na difríochtaí fisiceacha, ceimiceach, nó airíonna leictreacha i measc móilíní DNA de mhéideanna éagsúla, na hidirdhealuithe sin a ghiaráil chun deighilt agus scagadh a bhaint amach.

íonú coirníní maighnéadach (Díluailithe Inchúlaithe Céim Soladach, SPRI) is é an modh is mó a úsáidtear agus is éifeachtaí faoi láthair, go háirithe i seicheamhú ard-tréchur (NGS) ullmhú leabharlainne.

Prionsabal:

Bunaithe ar an ngaol idir méid blúirí DNA agus éifeachtúlacht ceangailteach coirníní maighnéadacha.

Ceangailteach:

Cuir tiúchan sonrach de glycol poileitiléin leis (PEG) agus salann (NaCl) leis an réiteach blúirí DNA, ansin coirníní maighnéadacha dromchla-mhodhnaithe a thabhairt isteach. I dtimpeallacht ard-salann, Díhiodráitíonn DNA agus nochtar a chnámh droma fosfáit, asaithe inchúlaithe ar dhromchla an choirníní trí idirghníomhaíochtaí hidreafóbach agus leictreastatacha. Is é an príomhphointe ná go gceanglaíonn blúirí DNA níos mó níos éasca agus níos luaithe ná blúirí beaga.

Frasaíocht agus Scaradh:

Cuir an feadán imoibrithe ar sheastán maighnéadach. Coirníní maighnéadacha (chomh maith le DNA faoi cheangal) cloí leis an bhalla feadán, ag fágáil tuaslagán gan cheangal agus blúirí beaga DNA san ollnóva.

Le haghaidh blúirí móra:

Cuir tiúchan níos ísle de thuaslagán PEG/salainn leis. Ní bheidh ach blúirí DNA móra ina gceangal leis na coirníní maighnéadacha. Caith amach an t-iarmhír (ina bhfuil blúirí gearra nach dteastaíonn), coinnigh na coirníní maighnéadacha, agus elute an DNA chun blúirí fada a fháil.

Le haghaidh blúirí gearr:

Ar dtús cuir tuaslagán PEG/salainn ar mheántiúchan leis chun an chuid is mó de DNA a cheangal (lena n-áirítear blúirí fada agus gearra araon) chuig na coirníní maighnéadacha. Caith amach an t-iarmhír, a bheidh go hiomlán devoid de DNA. Ar aghaidh, cuir PEG/maolán nó tuaslagán uisce ísealtiúchan leis. Beidh blúirí DNA gearra de rogha ar dhícheangal ó na coirníní maighnéadacha. Cuir an meascán ar ais ar an seastán maighnéadach. Pípéad as an snámhán ina bhfuil na blúirí beaga sprice, ag caitheamh na blúirí móra fós ceangailte leis na coirníní.

Imscrúdú Turgnamhach:

Roghnaíomar coirníní maighnéadacha branda eachtrach A (10 mg/ml) agus R ár gcuideachta&D táirgí: 220011 (50 mg/ml), 220012 (25 mg/ml), 220021 (50 mg/ml), agus 220022 (25 mg/ml) (Tábla 1). Rinneadh a n-ábhar soladach a chaighdeánú go 1.2 mg/ml faoi shaintiúchain salainn agus faoi chéatadáin PEG. Tar éis na céimeanna íonú le haghaidh roghnú blúirí, rinneadh an chéad bhabhta de íonú 0.6X, ina dhiaidh sin beidh an dara babhta de íonú 0.2X ar an snámhán ón gcéad bhabhta. Taispeántar na torthaí i bhFíor 1.

Tábla 1: Coirníní maighnéadacha roghnaithe don turgnamh roghnúcháin blúirí

Níl.	1	2	3	4	5	6
Coirníní	A	220011	220012	220021	220022	220022'

Nóta: 220022′ ina bhaisc eile de choirníní maighnéadacha

Léiríonn na torthaí go bhfuil sa chéad bhabhta de íonú 0.6X, na coirníní A coigríche, 220011, 220021, 220022 agus 220022′ a shórtáil thar 500bp, agus 220012 a shórtáil suas go dtí 400bp; ón dara babhta de scaradh 0.2X, na coirníní A coigríche, 220021, 220022 agus 220022′ curtha in eagar go príomha 300-500bp, ina measc 220011 bhí beagán iarmhar aige mar gheall ar an mblúire mór agus ba ghá é a bharrfheabhsú tuilleadh, agus 220012 is gá a bharrfheabhsú tuilleadh mar gheall ar íogaireacht na 220011 go pH. 'an príomhshórtáil 300-500bp, mar atá 220011 tá beagán iarmhar aige mar gheall ar na bannaí móra, is dócha mar gheall ar 220011 níos íogaire do pH riachtanais a bharrfheabhsú tuilleadh, agus 220012 is féidir mar gheall ar an gcéad bhabhta den aisghabháil níos airde a choigeartú go cuí ar thiúchan na n-ian salainn agus PEG nó an cóimheas toirte sórtála a choigeartú go 0.55X + 0.2X chun an éifeacht sórtála céanna a bhaint amach.

Ón staidéar thuas, is féidir linn a fheiceáil go bhfuil ár 220011, 220012, 220021 agus 220022 tá cumas iontach acu coirníní maighnéadacha eachtracha a athsholáthar.

Tá na buntáistí a bhaineann le tréchur ard ag íonú coirníní maighnéadach, uathoibriú, tapa agus gan imoibrithe tocsaineacha (mar eatánól), ionas gur féidir é a úsáid go forleathan i íonú leabharlainne NGS, íonú táirge PCR, sórtáil cDNA agus mar sin de.

Tuigimid go mbraitheann atáirgtheacht taighde eolaíoch ar ardchobhsaíocht imoibrithe. Déantar rialú cáilíochta dian ar gach baisc de choirníní maighnéadacha chun a chinntiú go bhfuil na cáithníní aonfhoirmeach agus go bhfuil an fheidhmíocht cobhsaí, a chinntíonn gur féidir leat torthaí comhsheasmhacha iontaofa a fháil do gach turgnamh. Úsáidtear ár gcuid táirgí go forleathan i gcásanna bitheolaíochta móilíneacha éagsúla cosúil le tógáil leabharlainne NGS, íonú táirge díleá, Sórtáil DNA blúirí, íonú cDNA, srl. Tá siad fíor-riachtanach “uilechoibhneasa” i do shaotharlann.

Soláthraí

Shanghai Lingjun Biteicneolaíocht Co., Teo.bunaíodh i 2016 atá ina mhonaróir gairmiúil d'ábhair bithmhaighnéadacha agus imoibrithe eastóscadh aigéid núicléacha.

Tá taithí shaibhir againn in eastóscadh agus íonú aigéad núicléasach, íonú próitéine, scaradh cille, ceimileacanacht, agus réimsí teicniúla eile.

Úsáidtear ár gcuid táirgí go forleathan i go leor réimsí, mar thástáil leighis, tástáil ghéiniteach, taighde ollscoile, pórú géiniteach, agus mar sin de. Ní chuirimid ar fáil ach táirgí ach freisin is féidir tabhairt faoi OEM, ODM, agus riachtanais eile. Má tá riachtanas gaolmhar agat, bíodh leisce ort teagmháil a dhéanamh linn .