संपर्क करें प्रपत्र

पीसीआर पर चुंबकीय मोतियों के निरोधात्मक प्रभाव को कैसे कम किया जा सकता है?

की उन्नति के साथ

सटीक दवा और एनजीएस अनुक्रमण लागत में कमी,आणविक निदान प्रयोगशालाओं में चुंबकीय मनका-आधारित न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण मानक अभ्यास बन गया है. उच्च पुनर्प्राप्ति दर प्राप्त करने और अपूर्ण निस्पंदन के कारण होने वाली त्रुटियों से बचने के लिए, शोधकर्ताओं की बढ़ती संख्या प्रवर्धन के लिए सीधे पीसीआर प्रणाली में न्यूक्लिक एसिड कैप्चर करने वाले चुंबकीय मोतियों को जोड़ने का विकल्प चुनती है.

तथापि

जबकि यह “चुंबकीय मोतियों के साथ पीसीआर” दृष्टिकोण वर्कफ़्लो को सुव्यवस्थित करता है, इसने कई अभ्यासकर्ताओं के लिए घातक निराशाएँ उत्पन्न की हैं: पीसीआर प्रवर्धन विफलता, ऊंचा सीटी मान, या यहाँ तक कि अनुपस्थित प्रवर्धन वक्र भी. इन मुद्दों के पीछे अपराधी अक्सर चुंबकीय मोती ही होते हैं, जो पीसीआर प्रणाली को बाधित करता है.

कई लोग सहज रूप से मानते हैं कि चुंबकीय मोती केवल निष्क्रिय ठोस वाहक हैं जिन्हें प्रवर्धन में हस्तक्षेप नहीं करना चाहिए. फिर भी प्रयोगात्मक डेटा लगातार व्यापक मनका-प्रेरित पीसीआर निषेध को प्रदर्शित करता है.

हमारे चुंबकीय मनका उत्पादों को नियोजित करने वाले प्रारंभिक प्रयोग 160011, 160013, और 220015 बीड-इन-पीसीआर के लिए पता चला:

नहीं.123456789
एमबी160011(50एमजी/एमएल)160013(50एमजी/एमएल)220015(50एमजी/एमएल)
सामग्री0.5एमजी0.75एमजी1एमजी0.5एमजी0.75एमजी1एमजी0.5एमजी0.75एमजी1एमजी

परिणाम इस प्रकार है:

वैद्युतकणसंचलन परिणामों के आधार पर, चुंबकीय मनका सांद्रता पर प्रवर्धन दक्षता 0.5 एमजी: 220015 < 160013 < 160011; ज्ञात चुंबकीय मनका कण आकार को देखते हुए: 220015 < 160013 < 160011, और उनके विशिष्ट सतह क्षेत्रों पर विचार कर रहे हैं: 160011 < 160013 < 220015, समान परिस्थितियों में प्रति मनका बंधन स्थल इस प्रकार हैं: 160011<160013<220015; यह समझा सकता है कि चुंबकीय मनका सांद्रता बढ़ने पर पीसीआर अवरोध अधिक स्पष्ट क्यों हो जाता है.

फलस्वरूप

इस पीसीआर प्रणाली में एक विशेष घटक-एक एन्हांसर-की आवश्यकता होती है. सामान्य वर्धकों में बीटाइन शामिल है, trehalose, डीएमएसओ (डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड), ग्लिसरॉल, और बीएसए (पशुओं से जुड़े टीके का अन्नसार). इनमे से, बीएसए एक बलि सब्सट्रेट के रूप में कार्य करता है, पॉलीमरेज़ को अवरोधक हस्तक्षेप से बचाने के लिए अधिमानतः चुंबकीय मोतियों से बांधना.

इसलिए हमने यह निर्धारित करने की कोशिश की कि क्या चुंबकीय मनका एकाग्रता को कम किया जा रहा है (0.025 मिलीग्राम–0.075 मिलीग्राम) के साथ अनुपूरक 100 पीसीआर बढ़ाने वाले के रूप में μg/एमएल बीएसए अधिक अनुकूल परिणाम देगा.

नहीं.123456789
एमबी160011(50एमजी/एमएल)160013(50एमजी/एमएल)220015(10एमजी/एमएल)
सामग्री0.025एमजी0.05एमजी0.075एमजी0.025एमजी0.05एमजी0.075एमजी0.005एमजी0.01एमजी0.015एमजी

परिणाम इस प्रकार है:

यह देखा जा सकता है कि 0.025 एमजी, 160011 और 160013 नियंत्रण से कोई अंतर प्रदर्शित नहीं होता, जबकि पर 0.05 एमजी और 0.075 का, उनकी प्रभावकारिता उत्तरोत्तर कम होती जाती है. 220015, पिछले विश्लेषणों के अनुरूप, यह न केवल उत्कृष्ट निलंबन गुण प्रदर्शित करता है, बल्कि कई बाध्यकारी साइटों के साथ एक बड़ा विशिष्ट सतह क्षेत्र भी रखता है. यह टैक पोलीमरेज़ के प्रभावी अवशोषण को सक्षम बनाता है, जिससे प्रवर्धन बाधित हो रहा है. जब चुंबकीय मनका एकाग्रता कम हो गई थी 0.005 एमजी, बैंड की तीव्रता नियंत्रण की केवल आधी तीव्रता तक पहुँची.

इन शर्तों के तहत मूलभूत अनुकूलन का पालन करना, हमारा 220013 प्रभावकारिता सत्यापन के लिए उत्पाद का चयन किया जाएगा।:

नहीं.12345678
एमबी220013(10एमजी/एमएल)220015(10एमजी/एमएल)
सामग्री0.003एमजी0.005एमजी0.007एमजी0.01एमजी0.003एमजी0.005एमजी0.007एमजी0.01एमजी

परिणाम इस प्रकार है:

यह देखा जा सकता है कि प्रदर्शन के परिणाम 220013 और 22015 अप्रभेद्य हैं.

उपरोक्त चुंबकीय मोती 160011, 160013, 220013, और 220015 सभी सिस्टम अनुकूलन के माध्यम से पीसीआर में इष्टतम परिणाम प्राप्त कर सकते हैं. वे POCT रैपिड परीक्षण में आवेदन के लिए उपयुक्त हैं, रोगजनक सूक्ष्मजीव का पता लगाना, स्वचालित निष्कर्षण, और इसी तरह के परिदृश्य.

देने वाला

शंघाई लिंगजुन बायोटेक्नोलॉजी कंपनी, लिमिटेडमें स्थापित किया गया था 2016 जो बायोमैग्नेटिक सामग्रियों और न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण अभिकर्मकों का एक पेशेवर निर्माता है.

हमारे पास न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और शुद्धिकरण में समृद्ध अनुभव है, प्रोटीन शुद्धि, कोशिका पृथक्करण, chemiluminescence, और अन्य तकनीकी क्षेत्र.

हमारे उत्पाद कई क्षेत्रों में व्यापक रूप से उपयोग किए जाते हैं, जैसे चिकित्सा परीक्षण, आनुवंशिक परीक्षण, विश्वविद्यालय अनुसंधान, आनुवंशिक प्रजनन, और इसी तरह. हम न केवल उत्पाद उपलब्ध कराते हैं बल्कि ओईएम का कार्य भी कर सकते हैं, ओडीएम, और अन्य जरूरतें. यदि आपको इससे संबंधित कोई आवश्यकता है, हमसे संपर्क करने के लिए कृपया स्वतंत्र महसूस करें .

न्यूज़लैटर अपडेट

नीचे अपना ईमेल पता दर्ज करें और हमारे न्यूज़लेटर की सदस्यता लें